Co-coltura di cellule di glioblastoma su neuroni modellati: una tecnica per monitorare la migrazione delle cellule di glioblastoma sui neuroni dell'ippocampo di ratto in vitro

Il glioblastoma possiede cellule staminali che migrano lungo i tratti assonali dei neuroni mielinizzati per invadere posizioni distanti nel cervello. Per ricapitolare la migrazione del glioblastoma o delle cellule GBM sui neuroni in vitro, iniziare prendendo un vetrino coprioggetti.

Attivare il vetrino coprioggetti mediante trattamento al plasma di ossigeno e innescarlo con un agente funzionalizzante. Questo trattamento favorisce un facile accesso alle sostanze chimiche nelle fasi successive. Aggiungere la soluzione PEGilata al vetrino coprioggetti e incubare. Questa soluzione ricopre il vetrino coprioggetti impedendo l'adesione dei neuroni in punti casuali.

Erogare un polimero fotoiniziatore sul vetrino coprioggetti e montarlo nella camera di imaging. Posizionare la camera sul tavolino di un microscopio a fluorescenza. Una volta all'interno, l'illuminazione UV attiva le molecole fotoiniziatrici localmente nelle aree designate corrispondenti ai micropattern previsti.

Le molecole fotoiniziatrici attivate fendono lo strato PEG sottostante, generando il modello desiderato. Ora, aggiungi la soluzione di laminina e incuba. La laminina - una glicoproteina - si deposita in punti specifici