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0 visualizzazioni • 5:19 min. • July 8th, 2025
Inizia prendendo un modello di topo femmina anestetizzata incinta posta in posizione supina. Prepara il topo rimuovendo i peli dalla regione addominale. Incidere la pelle e gli strati muscolari sottostanti per esporre le corna uterine, i siti che ospitano gli embrioni vitali.
Ora, estrai le corna uterine dalla cavità addominale. Prendi un capillare di vetro a punta affilata contenente la soluzione di DNA plasmidico desiderata. Localizzare il cervello dell'embrione e iniettare la soluzione di DNA plasmidico attraverso la parete dell'utero nel quarto ventricolo. Questa posizione è anteriore al primordio cerebellare, la posizione desiderata per l'eventuale consegna del DNA.
Dopo l'iniezione, ritrarre il capillare vuoto. Successivamente, per l'elettroporazione dell'embrione iniettato nel DNA, posizionare i due elettrodi sulla parete uterina in modo tale che l'elettrodo positivo copra il primordio cerebellare e l'elettrodo negativo copra la regione intorno alle orecchie.
Applicare impulsi elettrici per la durata desiderata. Questi impulsi rendono permeabili le cellule neuronali cerebellari, consentendo al DNA plasmidico di entrare nelle cellule bersaglio. Infine, riposiziona le corna ut
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