Generazione di microtumori: una tecnica di coltura in vitro per la coltura di microtumori 3D per analizzare la risposta al trattamento farmacologico

I microtumori - aggregati tridimensionali di cellule tumorali in vitro - imitano da vicino il microambiente tumorale in vivo e fungono da piattaforme promettenti per valutare l'efficacia dei farmaci. Per generare microtumori, iniziare con una sospensione uniforme di cellule tumorali derivate dal paziente.

Quindi, diluire la sospensione cellulare con il volume desiderato di una matrice extracellulare raffreddata di derivazione umana o ECM. Pipettare piccoli volumi di questa miscela di matrice cellulare su una piastra metallica personalizzata contenente perni con rivestimento idrofobico. Il rivestimento idrofobico sui perni consente alle goccioline di mantenere la loro forma sferica.

Incubare per facilitare la gelificazione della MEC, incorporando le cellule all'interno. Ora, trasferire le perle di gel incorporate nelle cellule in una piastra di coltura di grande volume contenente un terreno adatto. Incubare per la durata desiderata. In coltura, le cellule incapsulate iniziano ad aggregarsi all'interno della matrice ECM, che fornisce un ambiente per la crescita cellulare non stimolata.

Inoltre, i componenti del terreno si diffondono attraverso la matrice e promuovono la proliferazion