Isolamento dell'epitelio delle papille circumvallate (CVP) dal modello murino: una procedura enzimatica per separare l'epitelio CVP dalla lingua di topo

0 visualizzazioni • 3:38 min. • July 8th, 2025

La superficie dorsale della lingua di topo è ricoperta da tre tipi principali di sporgenze rialzate chiamate papille, vale a dire papille fungiformi, circumvallate e filiformi. Le papille circumvallate, o CVP, che comprendono trincee epiteliali che ospitano le papille gustative, sono sostenute da uno strato di tessuto connettivo, la lamina propria.

Per isolare l'epitelio CVP, iniziare con un topo soppresso in posizione supina. Quindi, incidere le guance e sezionare la spessa fascia di tessuto - il frenulo linguale - per separare la lingua dal pavimento della cavità orale. Trasferire la lingua asportata in una pirofila contenente tampone freddo.

Quindi, ritaglia la parte anteriore della lingua. Iniettare con cautela un cocktail digestivo contenente enzimi dispasi e collagenasi nello spazio subepiteliale della regione CVP, tra l'epitelio e i tessuti sottostanti. Ritrarre l'ago mentre si inietta la sospensione nella regione.

Incubare la lingua per la durata appropriata. Le dispasi e le collagenasi digeriscono le proteine della matrice extracellulare all'interno del tessuto connettivo, facilitando la separazione dell'epitelio CVP dal tessuto. Dopo l'incubazione, praticare delle incisio

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Digestione enzimatica