Modello di pancreatite biliare acuta: un metodo per generare un modello murino di pancreatite biliare acuta tramite infusione del dotto pancreatico

Il dotto pancreatico trasporta gli enzimi digestivi e si collega con il dotto biliare comune vicino all'intestino. Questi dotti formano un canale in cui i sali biliari attivano gli enzimi digestivi prima di uscire nell'intestino.

Quando i calcoli biliari ostruiscono questo canale, la bile scorre all'indietro, attivando gli enzimi digestivi nel pancreas stesso, portando alla pancreatite biliare acuta, una grave condizione infiammatoria. Per imitare questa condizione in un modello murino, preparare un topo anestetizzato in posizione supina.

Incidere la parte superiore dell'addome, sotto il torace. Quindi, tirare la parte superiore dell'intestino tenue con il pancreas e fissare le sue estremità laterali per accedere alla regione periampollare, una struttura anatomica complessa che include l'apertura del dotto pancreatico.

Fissare le estremità prossimale e distale del dotto biliare comune per evitare perdite in altri organi. Quindi, collegare una siringa riempita con soluzione di taurocolato di sodio a una pompa per infusione. Il taurocolato di sodio è un sale biliare che attiva gli enzimi per la digestione dei grassi.

Ora, inserisci l'ago nella regione periampollare e inizia a perfondere alla velocità e concentrazione ottimali per la durata desiderata. Dopo la perfusione, rimuovere l'ago e i punti di sutura. Rimetti l'intestino nel peritoneo.

Sutura l'incisione. Consenti al mouse di riprendersi. Alla fine, il taurocolato di sodio entra nel pancreas e attiva gli enzimi digestivi, causando danni al pancreas.

Dopo aver controllato la profondità dell'anestesia con un pizzico di dita, pulire la zona addominale di un topo anestetizzato con una soluzione di iodio povidone al 5%. Utilizzando un rifinitore, rimuovere i peli tra il torace e il basso addome e pulire un'area chirurgica di circa 2 centimetri quadrati con alcol al 70%. Immobilizzare l'animale sulla tavola chirurgica e utilizzare le forbici per tagliare 5 millimetri di pelle orizzontalmente sulla parte superiore dell'addome e 1 centimetro sotto il processo xifoideo. Ripetere il taglio sul peritoneo.

Per eseguire la laparotomia con un'esposizione minima della cavità, utilizzando un trattore tirare il fegato verso la testa a circa 1 centimetro dall'intestino e localizzare la regione del pancreas e il duodeno. Usando una pinza, solleva il fegato verso la testa dell'animale. Tirando delicatamente la porzione dell'intestino tenue, fissare le due estremità laterali con una sutura in polipropilene 6-0 per una migliore visione della porzione distale del tubo del dotto biliare comune.

Utilizzando una clip per microvasi, occludere temporaneamente il dotto biliare comune prossimale. Esporre l'organo fuori dalla cavità addominale. Quindi, eseguire un'occlusione temporanea del dotto biliare comune distale con un 8-0 sutura. Per accedere al dotto biliare comune, perforare la regione periampollare, che appare come una parte biancastra della parete dell'intestino tenue, con un ago da 0,4 millimetri collegato a un tubo di polietilene da 0,54 millimetri. Avviare la pompa per infusione per l'infusione di soluzione di taurocolato di sodio al 2,5% a una velocità costante di 10 microlitri per 10 grammi di peso corporeo per 3 minuti.

Dopo l'infusione, rimuovere la clip per microvasi, il temporaneo 8-0 sutura e l'ago per iniezione dal dotto biliare pancreatico. Sutura l'addome con una sutura in polipropilene monofilamento non assorbente 6-0. Il tempo tra la laparotomia e la sutura finale non deve essere superiore a 30 minuti. Dopo l'intervento, alloggiare gli animali in scatole di polietilene rivestite con trucioli di legno e acqua e cibo ad libitum.