0 visualizzazioni • 4:51 min. • July 8th, 2025
La valvola aortica del cuore è una struttura a tre lembi composta dalle cellule interstiziali della valvola interna o VIC distribuite in tutta la densa matrice extracellulare e dalle cellule endoteliali valvolari sovrastanti o VEC.
Per isolare i VIC, in primo luogo, preparare un topo soppresso in posizione supina. Attraverso l'incisione addominale e toracica della linea mediana, esporre il cuore. Fai una piccola incisione tra l'atrio sinistro e il ventricolo seguita da perfusione salina per drenare il sangue. Recidere l'aorta ascendente a livello dell'arco aortico e prelevare il cuore.
Analizza e scarta i due terzi distali dei ventricoli prima di sezionare longitudinalmente la parte rimanente del cuore per rivelare i lembi della valvola aortica a forma di U. Accisare i lembi e sciacquare con un tampone freddo per rimuovere il sangue.
Successivamente, trattare i lembi con una soluzione di collagenasi a bassa concentrazione e incubare. A basse concentrazioni, la collagenasi - un enzima proteolitico - rompe solo parzialmente la matrice extracellulare, rimuovendo i VEC superficiali dai lembi.
Centrifugare e sostituire il surnatante contenente enzima con il tampone, trasferendo il pelle
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