Banding dell'arco aortico trasverso in modello murino: una tecnica minimamente invasiva nei topi per l'induzione di alta pressione nel ventricolo sinistro

La costrizione aortica trasversa minimamente invasiva o il banding dell'arco aortico è una procedura semplificata per generare un modello murino di malattia cardiovascolare. Inizia con un topo anestetizzato in posizione supina. Radere il collo e la regione del torace. Eseguire un'incisione sulla linea mediana per esporre lo strato muscolare sottostante.

Tagliare lo strato muscolare per accedere alla ghiandola tiroidea e allo sterno. Quindi, separa i muscoli tracheali e taglia lo sterno per rivelare la ghiandola del timo sottostante. Separare i lobi del timo l'uno dall'altro per rivelare l'arco aortico trasverso e le arterie carotidi. Posizionare un ago curvo sotto l'arco aortico e spingerlo verso l'esterno tra la parete del vaso.

Passare una legatura attraverso questa perforazione e posizionare un distanziatore nell'anello per regolare il diametro dell'anello. Ora, stringi la sutura attorno all'aorta per occludere il vaso. Ciò aumenta la velocità del flusso sanguigno nell'arteria carotide destra, causando un aumento della pressione sanguigna nell'aorta ascendente e nel ventricolo sinistro.

Successivamente, rimuovere il distanziatore e tagliare il filo. Quindi, riposizionare gli organi e suturare la pelle. Trasferisci il topo nella gabbia di recupero e monitora la sua funzione cardiaca. Il bande aortico induce un sovraccarico ventricolare sinistro, con conseguente ispessimento delle pareti della camera e diminuzione della gittata cardiaca.

Prima di iniziare la procedura, utilizzare un portaaghi per curvare le punte di due o quattro aghi calibro 30 e montare gli aghi sui singoli applicatori di cotone. Quindi, smussare un ago calibro 27 e utilizzare il supporto dell'ago per piegare la punta di 90 gradi. Quindi, leviga la punta su una superficie dura per realizzare un distanziatore da 0,4 millimetri. Dopo aver confermato il livello appropriato di sedazione in caso di mancanza di risposta al pizzicamento delle dita, applicare un unguento sugli occhi dell'animale e posizionare il mouse su un termoforo riscaldato a 37 gradi Celsius in posizione supina.

Fissare gli arti al termoforo con nastro chirurgico. Quindi, disinfettare la pelle con tre salviette consecutive di alcol e soluzione di iodio povidone e posizionare un telo sterile con un campo operatorio esposto sopra l'animale. Per iniziare la procedura di legatura, utilizzare un bisturi sterile per aprire la pelle nella posizione della linea mediana del collo e del torace. Successivamente, sotto un microscopio da dissezione, usa le forbici smussate per separare delicatamente i tessuti connettivi e tirare la ghiandola tiroidea verso la testa.

Usando gli aghi curvi, separare lo strato muscolare sulla trachea sulla linea mediana verso entrambi i lati dell'animale e utilizzare le forbici smussate per tagliare lo sterno di circa 5 millimetri alla seconda costola. Aprire l'incisione con una pinza curva e utilizzare un ago curvo per separare i lobi del timo e la parete toracica inferiore. L'arco aortico trasverso e due arterie carotidi saranno chiaramente visibili a questo punto.

Posiziona l'ago curvo sotto l'arco e usa la punta per praticare una perforazione tra la parete del vaso e il tessuto connettivo sull'altro lato. Utilizzare l'ago per posizionare una sutura monofilamento 6-0 sotto l'arco aortico e posizionare il distanziatore precedentemente preparato nell'anello. Fissare la sutura in posizione con un doppio nodo e rimuovere delicatamente il distanziatore.

Dopo aver confermato la riuscita costrizione del nodo, tagliare le estremità della sutura e utilizzare una sutura di seta 6-0 per chiudere la parete toracica con un semplice modello di sutura interrotto, seguito dalla chiusura della pelle con una sutura monofilamento 6-0 in un modello di sutura continua. Quindi, applicare la soluzione di iodio povidone sul sito di sutura e posizionare l'animale in una gabbia preriscaldata per il recupero e il monitoraggio post-operatorio.