Iniezione di colorante blu di metilene nel tratto urinario embrionale di topo: un metodo per valutare l'ostruzione congenita nel tratto urinario

Per valutare l'ostruzione del tratto urinario, iniziare immobilizzando un embrione di topo perinatale in posizione supina. Ora, seziona la cavità addominale dell'embrione per individuare un tratto urinario completamente sviluppato, che consiste in un paio di reni, ureteri e una vescica comune con uretra.

Quindi, prendi una siringa vuota collegata al tubo dotato di un microago. Riempire l'assemblaggio con una soluzione di blu di metilene, un colorante di tracciamento blu intenso. Inserire il microago nel lume della pelvi renale - un'estremità prossimale dilatata a forma di imbuto dell'uretere nel rene - e iniettare la soluzione colorante.

A causa della pressione idrostatica, il colorante scorre dalla pelvi renale dei reni attraverso l'uretere e infine si accumula nel lume della vescica. Ripetere la procedura di iniezione del colorante con il rene controlaterale per controllare il flusso di colorante dal lato corrispondente del tratto urinario.

Infine, utilizzare uno stereomicroscopio con una fotocamera per visualizzare il tratto urinario. All'imaging, un tratto urinario non ostruito mostra una vescica profondamente macchiata, mentre il tratto urinario anormale con ostruzione limita