0 visualizzazioni • 3:45 min. • July 8th, 2025
La microscopia intravitale ad alta risoluzione, tramite una finestra di imaging pancreatico impiantata, facilita la visualizzazione a lungo termine e ad ampio livello cellulare delle isole pancreatiche in un animale vivo.
Per l'impianto della finestra di imaging pancreatico, posizionare innanzitutto un topo anestetizzato in posizione laterale sinistra. Quindi, fissa una sonda per monitorare la temperatura del mouse e regolarne la temperatura utilizzando un termoforo. Ora, radere il fianco sinistro e sterilizzare l'area.
Praticare un'incisione chirurgica e sezionare i muscoli addominali. Inserire le suture appropriate nel margine dell'incisione per fissare il telaio della finestra di imaging in posizione dopo l'impianto. Inoltre, esporre ed esteriorizzare la milza e identificare il pancreas collegato.
Quindi, sovrapporre il pancreas collegato alla milza sulla piastra della finestra di imaging pancreatico personalizzata, con la milza posizionata nello spazio aperto della finestra. Questo posizionamento del pancreas lo isola efficacemente dai movimenti intestinali vicini, riducendo gli artefatti indotti dal movimento durante l'imaging. Applicare con cura la colla cianoacrilica sul margine della finestra di imaging, evitando gli organi.
Montare un vetro di copertura sul margine della finestra di imaging. Stringere le suture attorno alla finestra di imaging per fissare la finestra in posizione. Il topo con la finestra di imaging pancreatico impiantato è pronto per l'imaging pancreatico intravitale.
Iniziare preparando la piattaforma chirurgica e disinfettando le superfici con etanolo al 70%. Dopo l'anestesia, utilizzare una sonda rettale con un termoforo omeoreo controllato per monitorare la temperatura corporea.
Rimuovere i peli dal fianco sinistro del topo e applicare alternativamente alcol e iodio, ruotando dal sito di incisione alla superficie esterna, senza mai tornare al sito di incisione e terminando con lo iodio. Quindi praticare un'incisione di 1,5 centimetri sul fianco sinistro del topo sezionando la pelle e il muscolo.
Utilizzare una sutura nera o in nylon 4-0 per eseguire una sutura con cordino della borsa nel margine dell'incisione. Raggruppare accuratamente la milza con una pinza ad anello e identificare il pancreas. Posizionando la finestra sul fianco del topo, passare la milza e il pancreas attraverso lo spazio aperto della finestra.
Quindi, posizionare delicatamente il pancreas sulla piastra della finestra di imaging mentre si posiziona la milza sullo spazio aperto della finestra. Utilizzare un ago per catetere calibro 31 per applicare gocce di colla N-butil cianoacrilato sul margine della finestra di imaging, assicurandosi che venga applicata una quantità minima di colla.
Applicare delicatamente un vetro di copertura rotondo da 12 millimetri sul margine della finestra di imaging. Quindi, tieni l'anello di sutura per inserirlo nella scanalatura laterale della finestra e legalo tre volte. Infine, per evitare l'interruzione di questi punti stretti quando i topi sono svegli, tagliare il sito prossimale massimale della cravatta.