Imaging intravitale: un metodo per l'osservazione a livello cellulare del pancreas di topo attraverso una finestra di imaging stabilizzata

L'imaging intravitale prevede la visualizzazione delle cellule di un animale vivo attraverso una finestra di imaging impiantata nell'animale. Consente l'osservazione a lungo termine delle dinamiche cellulari senza comprometterne le funzioni.

Per iniziare, prendi un topo transgenico anestetizzato precedentemente impiantato con una finestra di imaging pancreatico supportata da una piastra metallica. La placca di base separa spazialmente il pancreas dall'intestino, riducendo così gli artefatti di movimento dovuti a movimenti fisiologici come la peristalsi.

Il topo transgenico esprime la proteina fluorescente verde o GFP sotto il promotore del gene dell'insulina espresso nelle cellule beta delle isole del pancreas.

Quindi, tieni saldamente la coda del topo e spruzza il disinfettante per rimuovere eventuali contaminanti superficiali. Inserire un catetere nella vena di coda laterale. Iniettare una soluzione contenente anticorpi marcati con una sonda fluorescente rossa nella vena caudale. Questi anticorpi si legano alle cellule che rivestono i vasi sanguigni, colorandoli di rosso.

Ora, sposta il mouse su una configurazione di microscopia intravitale. Inserire la finestra di imaging pancre