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Biologia
0 visualizzazioni • 2:45 min • July 8th, 2025
L'occhio murino è ricoperto da tre strati: la sclera fibrosa più esterna, il mantello coroideo medio e la retina più interna. La cavità a forma di coppa tra la retina e il cristallino contiene umor vitreo, un mezzo gelatinoso che aiuta a trasmettere la luce alla retina. A sua volta, la retina passa le informazioni visive risultanti attraverso il nervo ottico al cervello.
Per estrarre la coppa retinica, prendi un topo soppresso ed enuclea il suo occhio. Immergere l'occhio in una capsula di Petri contenente un tampone ghiacciato appropriato per prevenire la degradazione dei tessuti. Posizionare la capsula di Petri sotto un microscopio da dissezione.
Taglia i resti del nervo ottico dalla base del bulbo oculare. Fai una piccola incisione alla giunzione tra la retina e la cornea, una copertura trasparente attorno al cristallino. Utilizzando questa apertura, eseguire un taglio circolare completo lungo la giunzione retina-cornea per staccare il cristallino e il gel dell'umor vitreo dall'occhio.
Rimuovere il cristallino e l'umor vitreo per ottenere una coppa oculare semicircolare contenente la retina rivestita da coroide e sclera. Crea più tagli superficiali in tutta la parte sclerale dell'oculare. Utilizzare questi tagli per separare gli strati esterni dell'occhio per ottenere una coppa retinica intatta per le applicazioni a valle.
Enucleare gli occhi di un topo adulto eutanasia e metterli in PBS ghiacciato in una capsula di Petri, quindi posizionare la capsula di Petri sotto un microscopio da dissezione. Usando le micro forbici, taglia il nervo ottico, quindi rimuovi con cura i muscoli retti extra attaccati all'esterno del bulbo oculare.
Usando un ago calibro 30, praticare un foro sul bordo della cornea. Quindi, utilizzare le micro forbici per dissezione fine per eseguire un taglio circolare lungo il bordo della cornea. Utilizzando una pinza da dissezione affilata, rimuovere la cornea, il cristallino e l'umor vitreo dalla conchiglia oculare. Fai diversi piccoli tagli sullo strato sclerale sul bordo della conchiglia oculare usando le micro forbici per dissezione fine. Usa due pinze da dissezione affilate per trattenere il tessuto sclerale su ciascun lato e tira lo strato sclerale con molta attenzione per rimuoverlo dalla retina neurale. Ripetere l'operazione intorno alla conchiglia oculare fino a rimuovere tutta la sclera e ottenere una coppa retinica intatta.