Raccolta del deposito adiposo bianco e marrone dal cucciolo di topo: una procedura chirurgica per raccogliere il tessuto adiposo bianco e il tessuto adiposo bruno dal cucciolo di topo

0 visualizzazioni3:28 min. • July 8th, 2025

Nei mammiferi, il tessuto adiposo o deposito di grasso - un tessuto connettivo specializzato composto principalmente da cellule adipose o adipociti può essere diviso in due tipi principali: tessuto adiposo bianco o WAT e tessuto adiposo bruno o BAT.

Il WAT è costituito da adipociti bianchi con pochi mitocondri e una singola gocciolina lipidica e immagazzina energia. Le principali WAT sono la WAT inguinale sottocutanea e la WAT viscerale.

Il BAT comprende adipociti bruni con numerosi mitocondri e goccioline lipidiche e regola la temperatura corporea. Questo tessuto può essere trovato nelle regioni interscapolare, cervicale e ascellare.

Per isolare questi tessuti adiposi, inizia con un cucciolo di topo soppresso nella posizione laterale sinistra. Quindi, fai un'incisione sulla pelle addominale. Ritrarre delicatamente la pelle verso gli arti.

Identificare il WAT sottocutaneo situato all'interno dello strato più interno della pelle, anteriormente al segmento superiore degli arti posteriori. Asportare con cura il WAT sottocutaneo sottile e allungato da sotto la pelle.

Ora, posiziona il cucciolo di topo in posizione prona. Incidere la pelle dorsale dalla scapola o dalla regione interscapolare verso la testa. Individua la BAT interscapolare, il tessuto rosso intenso tra le scapole. Rimuovere delicatamente il BAT interscapolare.

Lavare i tessuti adiposi raccolti con un apposito tampone refrigerato. Conservare i tessuti adiposi in provette contenenti tampone a basse temperature fino a un'ulteriore lavorazione.

Per raccogliere il tessuto adiposo bianco sottocutaneo, tagliare la pelle intorno all'addome di un cucciolo appena nato soppresso e tirare delicatamente la pelle sotto le gambe. Senza raccogliere alcun tessuto cutaneo, raccogli con cura il deposito di grasso, che apparirà come un tessuto chiaro o bianco, sottile e allungato attaccato all'interno della pelle o sopra i quadricipiti. Sciacquare il deposito raccolto in PBS e posizionare il tessuto adiposo in una provetta da 1,5 millilitri contenente 250 microlitri di PBS e 200 microlitri di tampone isolante 2X su ghiaccio.

Per raccogliere il tessuto adiposo marrone interscapolare, tirare la pelle dalle scapole sopra la testa e sollevare il tessuto adiposo rosso scuro situato tra le scapole. Fai con cura delle incisioni tutto intorno all'adiposa per staccarla dal corpo e controlla la consistenza e il colore del tessuto. Dopo il risciacquo, posizionare il fazzoletto in una seconda provetta da 1,5 millilitri contenente 250 microlitri di PBS e 200 microlitri di tampone isolante 2X su ghiaccio.