JoVE Encyclopedia of Experiments
Biologia
0 visualizzazioni • 3:58 min • July 8th, 2025
La resezione apicale di un topo neonatale è una procedura per rimuovere l'apice ventricolare sinistro del cuore. La lesione risultante attiva i macrofagi cardiaci neonatali che promuovono i processi cellulari per la riparazione cardiaca. Tuttavia, questa capacità rigenerativa diventa limitata nell'età adulta, portando a insufficienza cardiaca. Il trapianto di macrofagi cardiaci neonatali nel cuore adulto può ripristinare la funzione cardiaca.
Per iniziare, metti un topo neonatale sul ghiaccio per indurre l'ipotermia che intorpidisce il topo. Trasferire e preparare il topo privo di sensi su una piattaforma chirurgica. Ora, sotto uno stereoscopio, incidi orizzontalmente il lato sinistro del torace e separa i muscoli sottostanti per visualizzare il cuore.
Applicare pressione sul torace e sull'addome per esteriorizzare il cuore. Tagliare con cura il tessuto dell'apice ventricolare fino a quando il sanguinamento non espone la camera ventricolare sinistra. Usando un batuffolo di cotone, premi il cuore nella cavità toracica. Sutura la parete toracica incisa. Applicare la colla per tessuti per unire la pelle. Successivamente, trasferire il topo su una coperta riscaldante per fermare l'ipotermia. Quindi, sposta il topo neonatale operato nella gabbia della madre per una pronta guarigione.
Dopo la resezione apicale, i macrofagi cardiaci residenti si accumulano nel sito leso. Successivamente, questi macrofagi possono essere isolati per il trapianto nel cuore adulto.
Iniziare preraffreddando la piattaforma operativa in bronzo durante la notte a meno 20 gradi Celsius. Estrarre il topo anestetizzato dalla ghiacciaia e metterlo sulla piattaforma. Ancorare il mouse in posizione supina utilizzando del nastro adesivo medico. Metti la piattaforma operativa con il mouse sotto uno stereoscopio e disinfetta il torace del mouse utilizzando un tampone imbevuto di betadina e alcol al 70%.
Incidere la pelle con un taglio di 1 centimetro nella quarta area intercostale della cavità toracica e separare i muscoli intercostali utilizzando le forbici microchirurgiche fino a quando non si accede al cuore. Premere alternativamente il torace e l'addome con l'aiuto di due pinze fino a quando il cuore non viene esteriorizzato fuori dal torace, senza alcun danno meccanico.
Posiziona le costole sotto e sopra la piccola incisione come fissazione naturale per immobilizzare il cuore. Individua l'apice del ventricolo sinistro e taglia un diametro di 1 millimetro di tessuto dell'apice ventricolare usando le forbici per iridectomia. Verificare che la camera ventricolare sinistra sia esposta e inizi a trasudare.
Premi delicatamente il cuore nella cavità toracica usando un batuffolo di cotone. Sutura i muscoli, le costole e la pelle usando 8-0 suture di prolina e pulire accuratamente il mouse dopo l'operazione. Trasferisci il mouse dalla piattaforma operativa a una coperta riscaldante a 37 gradi per riscaldare il corpo subito dopo l'operazione.
Confermare l'anabiosi del topo osservando i segni del ripristino spontaneo della respirazione, il cambiamento del colore della pelle da pallido a rosa e il movimento degli arti. Riporta il mouse utilizzato da sua madre, una volta che si è ripreso. Se necessario, mescola il topo operato e i materiali di nidificazione di sua madre.