0 visualizzazioni • 3:21 min. • July 8th, 2025
I vasi linfatici sono presenti nel derma cutaneo e la loro funzione è quella di rimuovere il liquido interstiziale in eccesso dal tessuto. Il danno ai vasi linfatici provoca un eccessivo accumulo di liquidi nello spazio interstiziale e un aumento della deposizione sottocutanea di tessuto fibroso e adiposo. Questi cambiamenti provocano linfedema.
Per generare linfedema nella coda murina, prendere un topo anestetizzato e posizionarlo in posizione prona. Effettuare un'escissione cutanea circonferenziale a tutto spessore in un sito opportunamente distante, distale alla base della coda. Incidere un altro sito sulla coda inferiore al primo taglio.
Praticare un'incisione cutanea verticale che colleghi le due incisioni preformate. Usando questo taglio, asportare il cerotto cutaneo sovrapposto per esporre le vene laterali e i vasi linfatici.
Prendi una siringa contenente colorante colorato e iniettala per via sottocutanea vicino all'estremità della coda, facendo apparire i vasi linfatici blu. Sezionare i vasi linfatici, avvolgere il sito della ferita e monitorare il topo per la durata desiderata.
La microdissezione arresta il flusso di linfa nei vasi e il fluido si raccoglie nello spazio tissutale. Di conseguenza, si osserva un linfedema sostenuto come gonfiore della coda di topo dorsale al sito chirurgico.
Per iniziare, posiziona il topo sedato di 8 settimane sternalmente e prepara la coda con alcol isopropilico al 70%. Usa un calibro per misurare il diametro della coda con incrementi di 5 millimetri a partire da 20 millimetri dalla base della coda. Segna un'incisione circonferenziale di 3 millimetri sulla coda a 20 millimetri dalla base.
Sotto ingrandimento microscopico chirurgico, eseguire una meticolosa escissione cutanea a tutto spessore di 3 millimetri, lasciando intatta tutta la vascolarizzazione sottostante. Incidere un segno circonferenziale superiore, prima attraverso il derma, seguito da un'incisione circonferenziale a tutto spessore a 3 millimetri distalmente alla prima incisione. Praticare un'incisione verticale perpendicolare a tutto spessore per collegare le due incisioni, quindi utilizzare un pickup dentato fine per afferrare un bordo d'attacco e sezionare in profondità all'interno del piano avascolare al derma e superficiale all'avventizia venosa, con microforbici.
Iniettare 0,1 millilitri di blu di isosulfan all'1% per via sottocutanea prossimale alla punta della coda. Identificare i due canali linfatici che appaiono blu a causa dell'iniezione, adiacenti alle vene laterali della coda. Sezionare attentamente i linfatici, sezionando un piano tra la vena laterale e il linfatico con forbici microchirurgiche diritte. Passare la punta di una lama di forbice tra il vaso linfatico e la vena laterale e chiudere le lame per sezionare il vaso linfatico. Al termine, vestire la ferita della coda con una medicazione trasparente aderente sterile.