Generazione di un modello di infezione del tratto urinario: una tecnica per somministrare batteri uropatogeni nel topo per sviluppare un modello di infezione del tratto urinario

0 visualizzazioni2:53 min • July 8th, 2025

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L'infezione del tratto urinario, o UTI, è causata principalmente dalla colonizzazione di batteri uropatogeni E. coli nei reni, negli ureteri, nella vescica o nell'uretra.

Per generare un modello murino UTI, iniziare posizionando un topo anestetizzato in posizione supina. Utilizzando uno stereomicroscopio, visualizzare la regione addominale inferiore del topo per individuare l'apertura uretrale rosa intenso.

Ora, prendi una siringa contenente la soluzione batterica uropatogena desiderata con una punta dell'angiocatetere attaccata ad essa. Inserire il catetere perpendicolarmente nell'uretra. Inclinare la siringa per posizionarla orizzontalmente e spingerla ulteriormente fino a raggiungere la vescica urinaria.

Quindi, instillare lentamente l'inoculo batterico nella vescica. Mantenere la siringa e il catetere in posizione per la durata desiderata per evitare perdite. Ritrarre lentamente il catetere dall'uretra e lasciare che i batteri proliferino.

Una volta all'interno, la popolazione batterica invade le cellule epiteliali superficiali della vescica, dove si replicano per formare comunità batteriche intracellulari, o IBC, nel citoplasma di queste cellule.

Alla fine, questi batteri si rilasciano nel lume della vescica, dove infettano le cellule vicine, causando la diffusione dell'infezione.

Il modello murino UTI è ora pronto per ulteriori analisi a valle.

Montare una punta sterile per anetheter calibro 24 su una siringa da 100 microlitri. Riempia la siringa con la soluzione batterica preparata. Posizionare un animale su una superficie di lavoro in posizione supina e mantenere un'anestesia stabile con isoflurano, utilizzando un cono nasale durante l'instillazione. Applicare l'unguento per gli occhi. Espellere l'urina residua applicando una leggera compressione e facendo movimenti circolari sulla regione sovrapubica. Quindi, pulire il basso addome con etanolo al 70%.

Lubrificare la punta del catetere con soluzione fisiologica. Metti il dito indice della mano non dominante sull'addome e spingilo delicatamente verso l'alto. Avviare il cateterismo dell'uretra verticalmente con un angolo di 90 gradi. Una volta riscontrata resistenza, inclinarlo orizzontalmente prima di inserirlo ulteriormente. Eseguire un'instillazione lenta di 50 microlitri di inoculo batterico. Dopo l'instillazione, tenere la siringa e il catetere in posizione per qualche secondo, quindi ritrarli lentamente per evitare perdite.

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Ultimo aggiornamento: 1 agosto 2026