Modellazione dell'occlusione tracheale fetale transuterina in modello murino: una procedura chirurgica per la legatura della trachea fetale all'interno di un topo gravido

0 visualizzazioni3:56 min. • July 8th, 2025

Posizionare una topolina gravida anestetizzata dell'età di gestazione desiderata in posizione supina. Sterilizzare la zona addominale. Eseguire la laparotomia, un'incisione chirurgica attraverso la parete addominale. Sezionare i muscoli addominali per esporre la cavità addominale.

Identifica le corna uterine, lunghe strutture tubolari che ospitano più feti, consentendo loro di svilupparsi contemporaneamente. Esteriorizzare delicatamente le corna uterine dalla cavità addominale, posizionandole con orientamento trasversale. Inoltre, visualizza il collo dell'embrione di topo candidato.

Inserire delicatamente un ago chirurgico con la sutura di spessore appropriato trasversalmente attraverso la regione del corno uterino, lontano dalla placenta. Far avanzare ulteriormente l'ago fino alla parte anteriore del collo dove si trova la trachea. Dirigere l'ago in modo che esca dal collo opposto al corno uterino. Stringere con cura la sutura per occludere la trachea, garantendo l'integrità della parete uterina. Riporta le corna uterine nella cavità addominale.

Iniettare soluzione salina calda nella cavità peritoneale per facilitare la progressione della gravidanza. Chiudere l'incisione chirurgica e consentire al topo di riprendersi. Il modello di occlusione tracheale fetale di topo può essere utilizzato per studiare l'impatto della trachea occlusa sullo sviluppo polmonare.

Pulire la superficie addominale con alcool e iodio povidone e mantenere condizioni sterili durante l'operazione. Eseguire un'incisione verticale per la laparotomia delle madri gravide e tagliare tutti gli strati separatamente. Identificare le corna uterine su ciascun lato e determinare i feti candidati per l'intervento chirurgico.

Operare su due feti in ogni corno uterino se c'è un numero pari di feti su ciascun lato e su un feto in ogni corno uterino se c'è un numero dispari. Utilizzando occhiali con ingrandimento 2x per la visualizzazione, posizionare il corno uterino in modo trasversale. Posiziona i cuccioli rivolti verso l'alto tra due dita usando gli occhi e la coda come guida.

Applicare una leggera pressione sulla testa del cucciolo per consentire l'estensione della testa e la visualizzazione del collo. Eseguire l'occlusione tracheale, o TO, utilizzando un ago atraumatico e una sutura in polipropilene 6-0. Tenere la placenta lateralmente e lontano dai punti di entrata e di uscita dell'ago.

Inserire l'ago trasversalmente attraverso il lato dell'utero, lontano dalla placenta, attraverso la parte anteriore di un terzo del collo. Quindi, sposta delicatamente l'ago sulla linea mediana del collo. Dirigilo verso la parte anteriore, quindi esci dal collo tra la trachea e di fronte alla guaina carotidea e all'utero.

Annodare la sutura, avendo cura di mantenere l'integrità delle membrane e della parete uterina. Riposizionare il corno uterino nell'addome e iniettare 2 millilitri di soluzione fisiologica calda e sterile nella cavità peritoneale prima della chiusura.

Posizionare una sutura in poliglactina 5-0 per chiudere la parete addominale e chiudere la pelle con una sutura di seta non corrente. Applicare 0,1 mg/kg di buprenorfina per via intraperitoneale per analgesia e lasciare che la madre si riprenda in un'incubatrice calda. Osservare che l'animale utilizzato può nutrirsi da solo e tenerlo da solo nella sua gabbia individuale.