Biopsia a pizzico guidata colonscopica in un modello murino: una tecnica per visualizzare ed estrarre campioni di tessuto dal colon di topo

In condizioni patologiche, la colonscopia consente la visualizzazione del colon e l'estrazione del tessuto mediante biopsia a pizzico per un'analisi dettagliata delle ferite infiammatorie.

Per eseguire la biopsia a pizzico guidata da colonscopia in un topo, iniziare con un assemblaggio di biopsia. Il gruppo contiene un'unità di connessione, una guaina dell'endoscopio con un colonscopio pre-inserito di diametro ottimale. Il colonscopio è collegato a una sorgente luminosa, una sorgente video, una porta del gas e una porta dello strumento per pinze per biopsia.

Successivamente, preparare un topo anestetizzato in posizione prona sulla piattaforma per colonscopia. Tirare la coda verso l'alto e utilizzare un ago per sonda gastrica per infondere nell'ano un tampone adatto per eliminare qualsiasi materia fecale. Quindi, inserire il colonscopio nell'ano e farlo avanzare nel retto. Continua a muovere il colonscopio più verso il colon mentre pompi gas per mantenere il colon gonfiato.

Quindi, estrarre la pinza dalla porta dello strumento e aprire le ganasce. Ruotare la pinza ad angolo retto per indurre una ferita di profondità ottimale. Le ferite troppo superficiali o troppo profonde provocano rispettivamente una ferita superficiale o una perforazione del colon. Successivamente, utilizzando una pinza per biopsia, pizzicare il tessuto del colon. Il tessuto estratto e la ferita indotta possono essere ulteriormente analizzati per comprenderne la fisiopatologia.

Prima di iniziare la procedura, inserire un endoscopio rigido da 1,9 millimetri in una guaina dell'endoscopio e collegare l'endoscopio assemblato alla sorgente luminosa e al dispositivo di imaging video secondo le istruzioni del produttore. Utilizzare il tubo in dotazione per collegare la pompa dell'aria alla valvola del gas sul lato sinistro della guaina, accanto al canale di lavoro.

Assicurarsi che il canale di lavoro sia in posizione aperta e inserire 3 pinze per biopsia Fr attraverso il canale di lavoro. Far avanzare la pinza fino all'estremità della guaina senza sporgere dalla guaina.

Successivamente, posizionare il topo anestetizzato su una piattaforma di stadiazione endoscopica sul lato ventrale e confermare il livello appropriato di sedazione per mancanza di risposta al riflesso del pedale. Dopo aver applicato l'unguento per gli occhi, riempire una siringa da 3 millilitri con un ago per topo attaccato con PBS a temperatura ambiente e inserire l'ago per circa 1 centimetro nell'ano del topo. Infondere delicatamente con PBS fino a quando il materiale fecale non è stato eliminato. Diversi pellet fecali dovrebbero uscire dal topo insieme al PBS che è stato infuso.

Inserire l'endoscopio assemblato di 0,5 centimetri nell'ano e far avanzare la pinza per biopsia nel lume libero del retto fino a quando le "mascelle" complete della pinza non superano l'estremità della guaina. Ruotare la pinza di 90 gradi in modo che le ganasce si aprano con orientamento est-ovest, aprire le punte e far avanzare la pinza di circa 1 centimetro, chiudendo e ritraendo la pinza con un movimento rapido e fluido per prelevare la biopsia. Per evitare di insufflare completamente il colon durante l'esecuzione della biopsia, lasciare aperto il lato destro della valvola del gas.