Isolamento delle miofibre: una tecnica per ottenere singole miofibre dal muscolo estensore lungo delle dita (EDL) di topo raccolto

Inizia con un topo soppresso in posizione supina. Sterilizzare l'arto posteriore. Rimuovere chirurgicamente la pelle e la fascia, un sottile involucro di tessuto connettivo sotto la pelle, per esporre i muscoli degli arti posteriori sottostanti.

Localizzare il muscolo tibiale anteriore o TA sul lato laterale della tibia. Tenendo il tendine distale TA, staccare il muscolo dal tessuto sottostante. Tagliare il muscolo vicino al ginocchio per asportare il muscolo TA, rivelando l'estensore lungo delle dita sottostante o il muscolo EDL situato nel compartimento anteriore dell'arto posteriore.

Incidere il tendine EDL distale e tirare il muscolo EDL verso il ginocchio. Tagliare il tendine EDL prossimale per asportare il muscolo EDL. Trasferire il muscolo raccolto in una provetta con terreno preriscaldato contenente enzimi collagenasi e incubare per la durata appropriata. Le collagenasi rompono il tessuto connettivo che circonda ciascuna fibra muscolare o miofibra all'interno del muscolo. Questa fase di digestione scioglie le miofibre dallo strato interno del muscolo.

Dopo l'incubazione, trasferire con cura il muscolo digerito in una piastra multipozzetto contenente terreni preriscaldati pe