Modello di cornea suina ex vivo di cheratite batterica: una tecnica per stabilire l'infezione batterica nelle cellule epiteliali corneali

Nell'occhio dei vertebrati, la cornea - il rivestimento protettivo più esterno - è infettata da Pseudomonas aeruginosa, con conseguente condizione infiammatoria corneale - cheratite.

Per stabilire un modello di cheratite corneale ex vivo, posizionare un bottone corneosclerale dell'occhio suino in una capsula di Petri. Questo segmento di tessuto è costituito dalla cornea circondata da resti di sclera, la copertura fibrosa dell'occhio. Integrare la capsula di Petri con terreni contenenti antibiotici per eliminare i microbi contaminanti dalla superficie epiteliale corneale.

Individua la parte centrale della cornea. Praticare incisioni superficiali orizzontali e verticali nel modello desiderato, perforando lo strato epiteliale corneale più esterno. Trasferire il tessuto inciso, con la cornea rivolta verso il basso, in uno stampo cavo specializzato.

Riempire la cavità corneale con agar liquefatto e lasciare solidificare, trattenendo il tessuto all'interno dello stampo. Capovolgere lo stampo per esporre la superficie ferita dell'epitelio corneale. Pipettare la sospensione di Pseudomonas nelle aree incise della cornea. Sovrapporre lo stampo con più terreno di coltura per una crescita batt