0 visualizzazioni • 3:24 min. • July 8th, 2025
L'occhio dei vertebrati è diviso in segmento anteriore, situato davanti al cristallino, e segmento posteriore, situato dietro il cristallino. Il segmento anteriore contiene la cornea, l'umore acqueo, l'iride, il corpo ciliare e il cristallino; mentre il segmento posteriore contiene l'umor vitreo, la retina, la coroide e il nervo ottico. Il segmento anteriore può essere coltivato per studiare la fisiopatologia dei disturbi oculari.
Per sezionare il segmento anteriore da un modello animale, iniziare con un occhio suino appena isolato. Rimuovere il tessuto extra-orbitale dall'occhio e lavare con tampone antibiotico. Posizionare l'occhio su una garza sterile imbevuta di antibiotici per prevenire la contaminazione dell'occhio.
Usando un bisturi, incidere l'occhio vicino alla regione equatoriale per aprire il guscio corneosclerale, lo strato fibroso e vascolare. Usa le forbici curve per isolare il segmento anteriore dalla parte posteriore dell'occhio. Capovolgere con cautela il segmento anteriore dell'occhio. Quindi, estrai l'umor vitreo e rimuovi l'obiettivo.
Asportare l'iride radialmente verso le radici dell'iride per rivelare la rete trabecolare, un tessuto pigmentato attraverso il quale l'umore acqueo fuoriesce dall'occhio. Rimuovere le tracce del corpo ciliare, lasciando una sottile fascia di tessuto. Pulisci la cornea con un batuffolo di cotone umido per rimuovere il pigmento residuo. Il segmento anteriore dell'occhio può ora essere coltivato per ulteriori esperimenti.
Dopo aver rimosso i tessuti orbitali in eccesso e aver lavato gli occhi con antibiotico-antimicotico-PBS, per emisectare l'occhio, posizionare l'occhio sulla garza imbevuta di antibiotico-antimicotico-PBS. Usa una lama di rasoio sterile o un bisturi per creare un'incisione vicino all'equatore dell'occhio. Quindi, emisectare l'occhio usando forbici chirurgiche curve per isolare l'occhio anteriore.
Usa le microforbici come una pala per raccogliere l'umor vitreo dal segmento anteriore e rimuovi la lente dal segmento anteriore con le microforbici. A poco a poco, tagliare radialmente l'iride fino alla radice dell'iride, fino a quando la rete trabecolare è visibile. Estendere il taglio di 360 gradi attorno all'iride, per esporre l'intera regione della rete trabecolare e, se necessario, ripulire l'iride residua che copre la rete trabecolare.
Tagliare i resti del corpo ciliare posteriormente alla regione della rete trabecolare, lasciando solo una banda sottile di 1 millimetro del tessuto. Dopo aver posizionato il segmento anteriore nella capsula di Petri, bagnare un batuffolo di cotone nel terreno e tamponare delicatamente al centro della cornea per rimuovere il pigmento. Tenere gli occhi con una pinza e rimuovere il pigmento in eccesso intorno alla sclera strofinando.