Coltura del segmento oculare anteriore: un metodo per coltivare la cornea con segmento anteriore dell'occhio suino

Per la coltura del segmento oculare anteriore, iniziare con un piatto di coltura adatto. La piastra di coltura ha un palco rialzato al centro, collegato a due porte del fluido per l'afflusso e il deflusso.

Innanzitutto, posiziona un segmento di occhio anteriore suino fresco contenente la cornea sul tavolino. Successivamente, posizionare un anello di bloccaggio sul segmento dell'occhio e fissarlo. Successivamente, preparare un set-up di perfusione comprendente una siringa riempita con un terreno di coltura adatto. Collegare la siringa a una valvola, un filtro e un tubo con un mozzo dell'ago piegato all'altra estremità.

Preparare un serbatoio assemblato in modo simile utilizzando una siringa vuota. Ora, collegare i mozzi dell'ago della perfusione e la configurazione del serbatoio rispettivamente alle porte di afflusso e di uscita. Perfondere delicatamente il terreno e lasciare che il segmento anteriore si gonfi.

Continuare la perfusione e lasciare che le bolle e il mezzo in eccesso fluiscano nel serbatoio. Successivamente, incubare la piastra di coltura all'altezza desiderata e alle condizioni fisiologiche standard. Il risultato è un modello tridimensionale che simula la complessa ar