Sistema microbioreattore in marmo liquido: un protocollo di coltura 3D per l'incapsulamento di ovociti suini

0 visualizzazioni3:29 min • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Preparare un letto di polvere di etilene propilene fluorurato, o FEP, in un piatto di coltura. Aggiungere una goccia di terreno di maturazione contenente complessi cumulo-ovociti, o COC, sulla polvere di FEP. Arrotolare delicatamente la goccia sulla polvere per formare una biglia liquida, o LM. La polvere di FEP crea un guscio poroso idrofobo, consentendo lo scambio di gas tra il liquido interno e l'ambiente circostante.

Ora, raccogli l'unità LM e trasferiscila nel pozzetto centrale di una capsula di Petri IVF. Aggiungere acqua sterile all'anello esterno per mantenere idratati i COC. Quindi, incubare il LM in condizioni fisiologiche per consentire la maturazione degli ovociti.

Quindi, rimuovere il terreno esaurito e aggiungere un mezzo di maturazione fresco. Il contatto diretto con il liquido interrompe il guscio idrofobo del FEP e rompe il LM per rilasciare i COC. Trasferire i COC rilasciati in un nuovo piatto contenente una goccia fresca di terreno di maturazione e lavarli per rimuovere le particelle di FEP.

Dopo il lavaggio, trasferire i COC e il terreno fresco sul letto di polvere FEP. Arrotolare la goccia per ricoprirla di polvere. Infine, trasferisci il LM nella piastra di Petri IVF. I LM verniciati a polvere FEP mantengono la struttura 3D degli ovociti e ne migliorano la vitalità.

Prepara un letto di 5 grammi di polvere di FEP in una capsula di Petri da 30 millimetri. Distribuire una singola goccia di terreno di maturazione, contenente da 3 a 5 COC sulla polvere FEP. Ruotare delicatamente la piastra con un movimento circolare per assicurarsi che le particelle coprano completamente la superficie della goccia di liquido e formino biglie liquide o LM.

Prepara diverse piastre di Petri per fecondazione in vitro da 60 millimetri e aggiungi da 3 a 4 millilitri di acqua sterile agli anelli esterni per creare una camera di umidità. Prelevare il LM formato con una pipetta da 1.000 microlitri e posizionarlo nel pozzetto centrale. Incubare le biglie per quattro giorni a 38 gradi Celsius in un incubatore al 5% di anidride carbonica.

Per cambiare il terreno, applicare 30 microlitri di terreno di maturazione su ogni LM, che lo farà diffondere. Quando il contenuto di marmo si è sciolto, trasferire i COC rilasciati dal bioreattore in una goccia di terreno di maturazione fresco nella capsula di Petri. Dopo 3 o 4 lavaggi in terreno di maturazione, trasferire i COC insieme a 30 microlitri di terreno fresco, sul letto di polvere FEP.

Ruotare delicatamente la piastra con un movimento circolare per assicurarsi che le particelle di polvere coprano completamente la superficie della goccia di liquido e formino un nuovo LM. Quindi, trasferire il LM nella piastra di Petri IVF.

12:37

Un metodo per l'incapsulamento follicolo ovarico e la cultura in un proteoliticamente degradabile 3 Sistema dimensionale

Video correlati

0 Visualizzazioni

10:48

In Vitro Crescita dei follicoli preantrali Mouse sotto condizioni di microgravità simulata

Video correlati

0 Visualizzazioni

09:30

Strategia di coltura in vitro per oociti dal follicolo antralico precoce nel bestiame

Video correlati

0 Visualizzazioni

07:03

Microiniezione degli ovociti mouse, Maturazione e Ploidia valutazione

Video correlati

0 Visualizzazioni

03:02

Isolamento del complesso di ovociti del cumulo suino: una tecnica per isolare il complesso di ovociti del cumulo dal follicolo ovarico suino per la fecondazione in vitro

Video correlati

0 Visualizzazioni

04:33

Coltura 3D di COC suini: una procedura per incapsulare complessi di ovociti cumulici in perle di idrogel polimerico di fibrina-alginato

Video correlati

0 Visualizzazioni

11:53

Generazione di organoidi testicolari porcini con Architettura Specifica Testis utilizzando Microwell Culture

Video correlati

0 Visualizzazioni

07:45

Idrogel alginato degradati proteolylylylyd e microbioreattori idrofobici per l'incapsulamento dell'Oocito Porcine

Video correlati

0 Visualizzazioni

08:01

Una strategia in due fasi che combina modificazione epigenetica e segnali biomeccanici per generare cellule pluripotenti di mammifero

Video correlati

0 Visualizzazioni

08:24

Ablazione laser multi-fotone di centri di organizzazione di microtubuli citoplasmatici in ovociti di topo

Video correlati

0 Visualizzazioni

Ultimo aggiornamento: 1 agosto 2026