Esecuzione dell'iniezione nel lobo orbitale della ghiandola lacrimale superiore: una tecnica per indurre la malattia dell'occhio secco nel modello di coniglio

La ghiandola lacrimale superiore si trova lateralmente sopra il bulbo oculare. La parte superiore di questa ghiandola è nota come lobo orbitale. Questo lobo presenta un'architettura tubuloalveolare, contenente un'estremità tubolare che si ramifica in più sacche a forma di alveoli.

Queste sacche sono rivestite dalle cellule sierose che secernono il liquido lacrimale, una secrezione protettiva acquosa. Questo fluido raggiunge i dotti lacrimali e scorre sulla superficie oculare per lubrificarla. La ridotta secrezione di questo fluido provoca la malattia dell'occhio secco, o DED.

Per indurre la DED, posizionare un coniglio anestetizzato in posizione prona. Applicare una pressione mediale sul globo oculare, provocando la sporgenza del lobo orbitale della ghiandola dall'incisura posteriore nell'orbita dell'occhio. Far avanzare la pinza dal cuoio capelluto fino al sito di protrusione. Fai una piccola rientranza sul cuoio capelluto per delimitare l'area di inserimento dell'ago.

Prendere una siringa contenente la soluzione di Concanavalina A, o Con A, e inserirla perpendicolarmente fino all'osso del cranio. Riorientare l'ago per raggiungere il lobo orbitale e iniettare la soluzione di Con A nel lobo orbitale.

Il Con A, un attivatore del sistema immunitario, induce l'infiltrazione dei linfociti nella ghiandola lacrimale. Questo fenomeno porta alla disintegrazione della rete di matrici extracellulari, distorcendo l'architettura tubuloalveolare della ghiandola. Alla fine, questi cambiamenti bloccano la secrezione del liquido lacrimale, producendo DED nell'occhio del coniglio.

Applicare una pressione mediale sul globo per far sporgere la ghiandola lacrimale orbitale superiore dall'incisione posteriore. Usando una pinza curva chiusa, indentare l'area fino a quando non si avverte l'apertura ossea nel cranio e applicare un'ulteriore modesta pressione con una pinza per lasciare una rientranza nella pelle che funga da punto di riferimento per il posizionamento dell'ago.

Inserire una siringa di tubercolina dotata di un ago calibro 27 perpendicolare alla pelle sopra il segno di rientranza di circa 1/4 di pollice nell'incisione e reindirizzare l'ago posteriormente ed esternamente verso il canto laterale, mirando al punto medio tra il sito di iniezione e il bordo orbitale osseo. Una volta raggiunto il mozzo dell'ago, iniettare lentamente 0,2 millilitri di una soluzione da 1.000 microgrammi di conA.