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Per generare un modello di infezione ossea batterica, iniziare posizionando un coniglio anestetizzato in posizione laterale. Rimuovi la pelliccia dall'arto posteriore per individuare la tibia, l'osso che collega il ginocchio alla caviglia. Segna un punto adiacente al piatto tibiale: l'estremità prossimale dell'osso della tibia.
Incidere la pelle e il periostio, uno strato di tessuto attorno all'osso, esponendo la tibia. Utilizzando il riferimento contrassegnato, creare una cavità nel midollo osseo. Inserire un tappo di cera per ossa nella cavità. Sutura il periostio e gli strati cutanei.
Successivamente, assumere una siringa contenente una soluzione di Staphylococcus aureus. Forare l'ago attraverso il tappo di cera ossea e inoculare la soluzione batterica nel midollo osseo. Espellere l'ago. Trasferisci il coniglio in una gabbia e monitora la diffusione dell'infezione.
Il tappo di cera ossea impedisce la fuoriuscita della sospensione batterica, consentendo ai batteri di proliferare nel midollo osseo. Questi batteri attirano i leucociti e i fattori infiammatori che portano all'osteomielite, un'infiammazione delle ossa che causa una riduzione dell'afflusso di sangue.
Queste condizioni alla fine portano alla formazione del sequestro, un'area necrotica nell'osso priva di afflusso di sangue. I batteri si infiltrano ulteriormente in quest'area per sfuggire al trattamento antibiotico, provocando un'infezione cronica.
Per impostare lo stampo dell'infezione ossea, confermare la mancanza di risposta al pizzicamento della zampa in un coniglio bianco neozelandese maschio di tre mesi e 3 chilogrammi e utilizzare un rasoio elettrico per rimuovere i peli dalla regione tibiale prossimale contro la direzione della crescita dei peli. Disinfettare la pelle esposta con una soluzione di iodio povidone e utilizzare una penna e un righello per contrassegnare l'estremità superiore della tibia e la posizione del foro di perforazione per l'iniezione di S. aureus, facendo attenzione che la posizione del foro di perforazione sia al centro orizzontale del piatto tibiale.
Quindi, usa un bisturi #11 per praticare un'incisione nella pelle, seguita da un'incisione di 1 centimetro nel peritoneo. Utilizzando un'unità di perforazione ossea elettrica, praticare un foro di 2 millimetri di diametro nella tibia e premere il foro con un cilindro di cera ossea di 2 millimetri di diametro e 2 millimetri di lunghezza. Rimuovere la cera ossea di riserva lungo il piano orizzontale del piatto tibiale e verificare che il foro sia pieno di cera ossea.
Quindi, utilizzare suture chirurgiche riassorbibili per cucire il periostio e la pelle, in una sutura verticale del materasso per evitare che l'animale mastichi i punti, e utilizzare un iniettore di asepsi da 1 millilitro per iniettare lentamente 1 x 108 CFU/mL di soluzione di S. aureus nel foro.