JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Tecniche Biologiche
0 visualizzazioni • 5:08 min. • July 8th, 2025
Per eseguire la microiniezione di cellule robotizzate, iniziare caricando una soluzione di polisaccaridi biocompatibile raffreddata e marcata in fluorescenza in un ago per microiniezione ottimizzato. Montare l'ago caricato sul supporto di un micromanipolatore programmabile per un posizionamento preciso dell'ago durante la microiniezione.
Trasferire un piatto di coltura contenente fette di tessuto cerebrale organotipico embrionale di topo in un terreno su un tavolino al microscopio riscaldato per mantenere le condizioni fisiologiche del tessuto. Concentrati sulla superficie basale della fetta di tessuto cerebrale, che comprende i neuroni piramidali, e immergi l'ago nel terreno per posizionarlo vicino ai neuroni da microiniettare.
Regolare la pressione di compensazione per evitare il riflusso del fluido nell'ago tramite l'azione capillare.
Utilizzando il software, definire la traiettoria e l'angolo dell'ago. Posizionare l'ago nel punto iniziale della traiettoria mappata e avviare la corsa automatizzata della microiniezione.
L'ago percorre una distanza specificata verso la cellula bersaglio. La forza applicata fa sì che l'ago prema contro la membrana cellulare, che crea tensione local
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