Trasfezione basata sulla magnetofeczione in vitro: una tecnica assistita da campo magnetico per fornire plasmidi in cellule neuronali primarie di topo utilizzando nanoparticelle magnetiche

Iniziare con il DNA plasmidico codificante una proteina fluorescente o la sospensione di pDNA in terreni. Aggiungere nanoparticelle magnetiche biocompatibili rivestite di polimero cationico alla sospensione di pDNA e incubare.

I polimeri cationici caricati positivamente interagiscono elettrostaticamente e si coniugano con il pDNA caricato negativamente, provocando la condensazione del pDNA e la formazione di "poliplessi magnetici" con una carica complessivamente positiva.

Ora, trasferire la miscela polyplex in una piastra multipozzetto contenente una coltura di cellule neuronali di topo primarie aderenti. Montare la piastra multipozzetto su una piastra magnetica e incubare.

Il campo magnetico generato dalla piastra magnetica provoca il sedimento e l'accumulo dei poliplessi sulla superficie della cellula neuronale. Questo stretto contatto con la superficie cellulare facilita il legame non specifico di poliplessi caricati positivamente ai proteoglicani associati alla membrana cellulare caricati negativamente.

Successivamente, i poliplessi vengono internalizzati tramite endocitosi, un processo in cui le regioni locali della membrana cellulare si invaginano e si staccano per formare ve