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Tecniche Biologiche
0 visualizzazioni • 2:44 min. • July 8th, 2025
La steatosi epatica è una condizione patologica caratterizzata da un eccessivo accumulo di grassi negli epatociti, un tipo di cellule epatiche importante. I grassi si depositano sotto forma di goccioline lipidiche di varie dimensioni nel citoplasma degli epatociti.
Strutturalmente, una gocciolina lipidica contiene un nucleo di grassi neutri e idrofobici come i trigliceridi e gli esteri del colesterolo. Il nucleo è circondato da un monostrato di fosfolipidi decorato con varie proteine.
Per visualizzare la deposizione di grasso, prelevare una piastra a più pozzetti contenente una coltura di epatociti aderente. Le cellule vengono pretrattate con un mezzo steatogeno per indurre l'accumulo di goccioline lipidiche al loro interno.
Aggiungere la concentrazione desiderata di paraformaldeide, che si diffonde nelle cellule, e reticolare le proteine. Questo passaggio disattiva le proteasi e preserva la struttura degli epatociti. Scartare la paraformaldeide e aggiungere la soluzione di Olio-rosso-O contenente il colorante organico disciolto in isopropanolo.
L'isopropanolo funge da solvente vettore per le molecole di Olio-rosso-O scarsamente solubili. Questo aiuta le molecole di colorante a ent
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