Colorazione del rosso del Nilo: una tecnica per rilevare e quantificare i lipidi neutri intracellulari nelle alghe

Le alghe sono organismi fotosintetici acquatici che producono una varietà di lipidi, di cui i lipidi neutri sono essenziali per la produzione di biodiesel.

Per rilevare e quantificare i lipidi neutri, mescolare un volume ottimale di sospensione algale ed etanolo in un pozzetto di micropiastra per microtitolazione nera. La parete cellulare e la membrana delle alghe, che impediscono la penetrazione della maggior parte delle macchie, diventano permeabili se esposte all'etanolo. Successivamente, combina l'etanolo con un colorante fluorescente liposolubile: il rosso del Nilo. Aggiungere questa miscela al pozzetto contenente alghe.

Posizionare la piastra per microtitolazione in uno spettrofotometro. Impostare un programma che garantisca l'incubazione con agitazione intermittente per facilitare l'interazione tra il colorante e le alghe.

Poiché il rosso del Nilo è idrofobo, non può attraversare facilmente il citoplasma. Solventi come l'etanolo, se accoppiati con il rosso del Nilo, mobilizzano il colorante e lo aiutano a raggiungere i corpi lipidici dispersi nel citoplasma. Il rosso del Nilo penetra quindi nei corpi lipidici e vi si solubilizza, colorando così i lipidi.

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