Colorazione negativa basata su capsule di campioni di virus su griglie TEM: una tecnica di colorazione con metalli pesanti per visualizzare l'ultrastruttura dei virus avvolti

Per la colorazione negativa dei virus avvolti, iniziare con la sospensione virale desiderata. Incubare i virus con glutaraldeide, un fissativo chimico. Al momento della penetrazione, la glutaraldeide lega le proteine virali e gli acidi nucleici, inattivando i virus preservando la morfologia, facilitando così la manipolazione sicura dei virus. Trasferire questa miscela in una piastra a più pozzetti.

Collegare le griglie per microscopia elettronica a trasmissione, TEM, contenenti una capsula a una pipetta tramite un accoppiatore. Utilizzando la pipetta, aspirare la miscela virus-fissante nella capsula. Incubare il gruppo pipetta per consentire ai virus di adsorbire sulle superfici della griglia.

Togliete il composto. Lavare la capsula, rimuovendo virus non aderenti e fissativi. Pipettare una soluzione di acetato di uranile, un colorante a base di metalli pesanti, nella capsula. Incubare per consentire alla macchia di entrare in contatto con i virus.

Gli ioni uranile si legano a specifiche glicoproteine di membrana e fosfolipidi sulle superfici virali. Gli ioni possono penetrare nei virus e legarsi alle proteine nucleocapside che racchiudono il genoma. Questo legame induce l'aggregazi