Colorazione H&E di sezioni di tessuto incluse in paraffina: una tecnica di colorazione differenziale per visualizzare sezioni di tessuto epatico utilizzando la combinazione di coloranti ematossilina ed eosina

Iniziare la colorazione con ematossilina ed eosina prelevando un vetrino contenente la sezione di tessuto inclusa in paraffina. Immergere il vetrino in una soluzione di deparaffinazione contenente xilene, un solvente organico che dissolve lo strato di paraffina attorno al tessuto, rendendolo accessibile alle macchie nei passaggi successivi.

Trattare la sezione di tessuto con alcol assoluto per rimuovere lo xilene. Immergere il tessuto in concentrazioni decrescenti di alcol. Questo passaggio reidrata il tessuto sostituendo l'alcol con l'acqua per una migliore compatibilità con i coloranti idrosolubili.

Colorare il tessuto con ematossilina basica, che nella sua forma ossidata si lega al mordente, un catione metallico. Questo complesso si lega elettrostaticamente agli acidi nucleici nel genoma, colorando il nucleo di viola.

Immergere la sezione colorata in una soluzione di differenziazione acida per rimuovere l'ematossilina in eccesso dal citoplasma, facendo apparire distinto il nucleo che trattiene il colorante. Trattare il tessuto con un agente azzurrante alcalino per neutralizzare gli acidi liberi. Questo fa regredire il colore del colorante viola al blu, migliorando i dettagli nuc