Colorazione Cresyl Violet di sezioni di tessuto: una procedura di colorazione per visualizzare la cartilagine e le ossa in sezioni di embrioni di topo congelati

Per visualizzare le regioni della cartilagine e dell'osso in una sezione di tessuto, iniziare con un vetrino che trasporta una sottile sezione di tessuto embrionale di topo congelato di interesse.

Scongelare brevemente la criosezione e immergerla in un'adeguata concentrazione di etanolo per rimuovere il mezzo di crioinclusione. La fase di rimozione aiuta a prevenire l'allentamento del terreno, che potrebbe altrimenti influire sulla visualizzazione dei tessuti durante la colorazione. Inoltre, l'etanolo fissa il tessuto, mantenendone la morfologia e l'integrità.

Quindi, pipettare una soluzione di violetta cresyl sul tessuto. Il violetto di cresile, un colorante basico caricato positivamente, si lega alle frazioni polianioniche come i proteoglicani nella matrice del tessuto cartilagineo. Mentre, nei tessuti mineralizzati come le ossa, reagisce con gruppi caricati negativamente come i gruppi fosfato nella matrice ossea.

Essendo un colorante metacromatico, il cresil viola colora diverse regioni del tessuto con colori diversi dal colorante naturale in base alla sua interazione con diversi costituenti chimici all'interno di quelle regioni.

Ora, lava il fazzoletto in una concentrazione di