JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Tecniche Biologiche
0 visualizzazioni • 3:32 min. • July 8th, 2025
In una popolazione eterogenea di cellule tumorali, il trattamento con un farmaco antitumorale ucciderebbe la maggior parte delle cellule, ma le cellule resistenti ai farmaci sopravvivono, con conseguente fallimento terapeutico.
Per determinare la proporzione di cellule resistenti ai farmaci, seminare una popolazione di cellule tumorali eterogenee in una piastra a più pozzetti. Incubare per facilitare l'adesione cellulare. Aggiungere una concentrazione crescente di una soluzione farmacologica antitumorale adatta.
L'interazione con le molecole del farmaco provoca la morte e, successivamente, il distacco delle cellule sensibili dalle piastre di coltura. Al contrario, le cellule resistenti ai farmaci sopravvivono e rimangono attaccate alla piastra.
Aspirare il terreno esaurito per rimuovere le cellule staccate. Aggiungere terreni freschi privi di farmaci e incubare la piastra in condizioni fisiologiche. Le cellule resistenti ai farmaci proliferano e formano colonie tumorali. Ora, aggiungi la soluzione colorante cristallovioletto alle colonie e incuba.
Il cristallovioletto, una colorazione di colore viola, permeabile alla membrana e caricata positivamente, entra nelle cellule e lega le
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