Colorazione con goccioline lipidiche di oenociti larvali di Drosophila: una tecnica per la valutazione dell'accumulo di goccioline lipidiche in condizioni normali e stressate utilizzando colorante a base di BODIPY

Gli enociti larvali di Drosophila sono cellule specializzate che si attaccano sotto forma di grappoli discreti sulla superficie basale dell'epidermide laterale, lo strato superficiale della pelle. Questi enociti sono principalmente coinvolti nel metabolismo dei lipidi.

Durante la fame, questi enociti accumulano goccioline lipidiche in eccesso. Ogni gocciolina è costituita da un nucleo idrofobico di lipidi neutri, come i trigliceridi, e esteri del colesterolo, circondato da un monostrato di fosfolipidi.

Per visualizzare le goccioline lipidiche, prelevare una sezione sezionata dell'epidermide larvale di Drosophila con gli enociti attaccati. Trattare con un tampone di fissazione contenente paraformaldeide per reticolare le proteine cellulari come le proteasi e preservare l'integrità strutturale degli enociti. Rimuovere il tampone di fissaggio. Incubare al buio con un colorante fluorescente a base di BODIPY per evitare il fotosbiancamento.

Durante l'incubazione, il colorante non polare si diffonde attraverso la membrana cellulare degli enociti e attraversa il monostrato che circonda le goccioline lipidiche. L'idrofobicità delle molecole di colorante consente il loro movimento nel nucle