JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Tecniche Biologiche
0 visualizzazioni • 2:42 min. • July 8th, 2025
I proteoglicani sono composti da una proteina centrale legata in modo covalente a catene di glicosaminoglicani solfatati.
Per visualizzare i proteoglicani, iniziare con scaffold a base di collagene - il substrato polimerico poroso - e seminare su di essi la sospensione di cellule staminali mesenchimali, o MSC. Ciò fornisce un supporto strutturale alle MSC e consente loro di crescere in superficie e all'interno delle cavità degli scaffelli.
Trattare i costrutti in un terreno di differenziazione condrogenica contenente fattori di crescita trasformanti che guidano la trasformazione delle MSC in condrociti maturi - cellule cartilaginose. I condrociti maturi secernono proteoglicani che formano una rete con il collagene nell'impalcatura.
Prendi una sezione preparata dal costrutto carico di condrociti. Aggiungere una soluzione acida di colorante blu di alcia integrata con cloridrato di guanidio e incubare. Durante l'incubazione, la guanidina cloridrato nella soluzione colorante dissocia tutti gli aggregati di proteoglicani per una migliore colorazione.
Successivamente, i glicosaminoglicani solfatati caricati negativamente dai proteoglicani si legano alle molecole di colorante blu alciano
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