JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Tecniche Biologiche
0 visualizzazioni • 4:14 min. • July 8th, 2025
I fibroblasti cardiaci attivati dallo stress depositano un eccesso di collagene nelle regioni lese, una condizione chiamata fibrosi, che compromette la funzione cardiaca.
Per visualizzare l'estensione della fibrosi, in primo luogo, sezionare i blocchi cardiaci inclusi in paraffina. Posiziona le sezioni su una diapositiva. Riscaldare il vetrino per sciogliere la paraffina, lasciando aderire le sezioni.
Immergere il vetrino nello xilolo per deparaffinare il tessuto. Trattare le sezioni con gradazioni alcoliche discendenti, per reidratare le sezioni e favorire il successivo legame dei componenti acquosi della macchia.
Incubare le sezioni in un fissativo acido che lega le proteine, stabilizzando la struttura del tessuto. Risciacquare con acqua per rimuovere i residui di fissativo.
Immergere il vetrino in una soluzione di ematossilina. Il colorante cationico lega il DNA caricato negativamente, colorando il nucleo di blu. Risciacquare con acqua per rimuovere le macchie in eccesso.
Incubare il vetrino nell'acido Fuchsin-Ponceau, un colorante anionico a piccola molecola che interagisce con proteine citoplasmatiche caricate positivamente e collagene, colorandole di rosso. Trattare con acido
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