JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Tecniche Biologiche
0 visualizzazioni • 2:49 min. • July 8th, 2025
La fibrosi è un aumento della deposizione di collagene fibrillare nella matrice extracellulare del tessuto danneggiato. Strutturalmente, comprende catene polipeptidiche di collagene a tripla elica.
Per colorare il collagene con il colorante rosso picrosirius, prendere una sezione di tessuto cardiaco fissata con paraformaldeide e inclusa in paraffina. Immergere la sezione di tessuto nello xilene - un solvente organico - per sciogliere la cera circostante.
Trattare in sequenza il tessuto deparaffinizzato con concentrazioni decrescenti di alcol per sostituire lo xilene. Immergere il tessuto in acqua per reidratarlo per una migliore visualizzazione delle macchie nei passaggi successivi.
Immergere il tessuto in una soluzione di rosso picrosirio contenente rosso di Sirio - un colorante azoico anionico - e acido picrico.
Il rosso Sirio contiene gruppi solfonici acidi che interagiscono con i gruppi amminici basici di lisina, idrossilisina e arginina presenti nel collagene. L'acido picrico aiuta a mantenere il pH acido, facilitando il legame delle molecole di colorante in un orientamento parallelo con il collagene.
Sciacquare i vetrini in una soluzione decolorante acidificata per rimuovere
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