Separazione basata sulla cromatografia su strato sottile di varianti di acido micolico: un metodo per separare i lipidi della parete cellulare micobatterica in base alla polarità

La parete cellulare micobatterica contiene diverse varianti di acidi micolici: acidi grassi a catena lunga con catene alfa conservate. Esistono differenze strutturali nelle loro catene beta, con conseguenti variazioni nella polarità di diversi acidi micolici.

Per separare le varianti utilizzando la cromatografia su strato sottile, o TLC - una tecnica di cromatografia liquida - prendere i lipidi della parete cellulare micobatterica nel solvente organico desiderato. Individuare i lipidi vicino alla base di una piastra TLC prerivestita con un sottile strato di materiale adsorbente, che funge da fase stazionaria.

Posizionare la piastra all'interno di un barattolo contenente un solvente organico - la fase mobile - assicurandosi che il livello del liquido sia al di sotto delle macchie del campione per prevenire la diffusione prematura degli acidi micolici.

Durante la corsa, la fase mobile sale attraverso i minuscoli pori dello strato adsorbente sulla piastra attraverso l'azione capillare. Alla fine, gli acidi micolici si dissolvono nel solvente e viaggiano verso l'alto.

Le varianti più polari dell'acido micolico vengono adsorbite transitoriamente dalla fase stazionaria polare attraverso