Cromatografia liquida con interazione idrofobica butil-dipendente: una tecnica per caratterizzare i coniugati anticorpo-farmaco basati su interazioni idrofobiche

I coniugati anticorpo-farmaco (ADC) si formano legando un anticorpo monoclonale bersaglio-specifico con farmaci citotossici tramite opportuni linker. Il processo di coniugazione stocastica crea ADC con un numero diverso di porzioni di farmaci.

Le specie ADC sono caratterizzate dal loro rapporto farmaco/anticorpo o DAR, che determina la loro efficacia terapeutica. L'idrofobicità degli ADC li rende candidati adatti per la cromatografia liquida con interazione idrofobica o per la caratterizzazione basata su HIC.

Per iniziare, assemblare una colonna cromatografica contenente una fase stazionaria basata su matrice di agarosio. La matrice è reticolata con le frazioni butiliche, i gruppi funzionali alchilici idrofobici. Equilibrare la colonna con un tampone legante il sale alto. Successivamente caricando la soluzione ADC sulla colonna.

Gli ioni salini nel tampone spostano le molecole d'acqua attorno agli ADC, esponendo le loro regioni idrofobiche. Ciò consente agli ADC di legarsi ai ligandi butilici tramite interazioni idrofobiche. Gli ADC con un numero maggiore di porzioni di farmaci legati mostrano un'interazione più forte con la colonna.

Sostituire lentamente il tampone ad alto contenu