Focalizzazione isoelettrica in fase liquida: una tecnica di elettroforesi per separare le molecole bioattive dall'estratto grezzo di Gymnema sylvestre

Iniziate con una cella IEF a focalizzazione isoelettrica preassemblata, un'unità di elettroforesi in fase liquida. Questa colonna è una camera porosa orizzontale compartimentata con terminali positivi e negativi distinti alle estremità.

Ora, prendete l'estratto vegetale contenente una miscela complessa di componenti di carica diversa con punti isoelettrici variabili, pI - un pH in cui la carica netta su una molecola è zero.

L'estratto è integrato con anfoliti di carica variabile che facilitano il successivo frazionamento dei componenti del campione.

Caricare il campione nelle porte di caricamento della colonna. Attualmente, la colonna IEF ha un pH costante. Quindi, applicare l'alta tensione per avviare l'elettroforesi.

Sotto il campo elettrico, gli anfoliti solubili migrano verso elettrodi di carica opposta e stabiliscono un gradiente di pH lineare attraverso la colonna. I componenti del campione iniziano a migrare attraverso il gradiente di pH in fase liquida e quelli posizionati a pH inferiore al loro pI hanno una carica positiva netta.

Questi migrano verso l'elettrodo negativo fino a quando i componenti raggiungono il loro pI, dove la loro carica si neutralizza e la migrazione s