Saggio dell'attività delle endotossine: un saggio biologico basato sulla chemiluminescenza per studiare l'attività delle endotossine in un campione di sangue

Nei batteri Gram-negativi, le endotossine lipopolisaccaridiche sono componenti vitali della membrana esterna batterica.

Strutturalmente, un'endotossina è costituita dall'antigene O, la catena polisaccaridica più esterna collegata tramite un nucleo centrale al lipide A, un glicolipide immunostimolante cruciale per l'attività dell'endotossina.

Per studiare l'attività delle endotossine, prelevare una provetta con un tampone adatto contenente anticorpi anti-lipide A, zymosan - un attivatore esogeno dei neutrofili e luminol - un agente chemiluminescente.

Sospendere un volume ottimale di un campione di sangue infetto comprendente endotossine e cellule del sangue, compresi i neutrofili. Incubare la provetta in condizioni fisiologiche.

Durante l'incubazione, l'anticorpo anti-lipide A riconosce il componente lipidico-A dell'endotossina e si lega ad esso tramite domini di legame dell'antigene, con conseguente formazione di un complesso anticorpo-endotossina.

Il dominio FC dell'anticorpo legato all'endotossina si lega al recettore complementare dei neutrofili, presentando le endotossine attaccate ai neutrofili. Questo legame agisce come stimolo di priming per i neutrofili, innescando la loro