Tecniche di saggio

In questo video, dimostriamo un test per stabilire la presenza di fosfolipasi nell'estratto di veleno grezzo di Anthopleura dowii, un anemone marino di mare. Il test utilizza una tecnica di diffusione su gel di agarosio, in cui l'enzima fosfolipasi diffonde e scompone i fosfolipidi incorporati nel mezzo solido in modo radiale.

In questo video, descriviamo un saggio di chiralità cellulare per determinare la distorsione di allineamento delle cellule in un confine geometrico confinato come un micropattern ad anello. La chiralità è una proprietà intrinseca della maggior parte dei tipi di cellule ed è determinata da fattori genetici e ambientali. Conoscere la chiralità di una normale popolazione cellulare può aiutare a sottoporre a screening le cellule trattate con farmaci.

Questo video descrive un test colorimetrico per misurare il test di attività della citrato sintasi mitocondriale presente nell'omogeneizzato tissutale di Drosophila.

In questo video, descriviamo un metodo colorimetrico per determinare il contenuto di ferro non eme nel tessuto epatico del topo. Il bafenantrolina sulfonato viene utilizzato come substrato cromogenico in presenza di un agente riducente, che converte il ferro ferrico in ferro ferroso chelabile.

Questo video mostra una tecnica di quantificazione per la CO2 rilasciata durante l'ossidazione del substrato utilizzando 14substrati radiomarcati con C. Il 14CO2 rilasciato viene intrappolato in una soluzione alcalina e quantificato da un contatore a scintillazione. L'ossidazione dei diversi substrati varia tra i tessuti e riflette la condizione fisiopatologica del tessuto.

In questo video, dimostriamo una procedura per studiare l'organizzazione della septina su un doppio strato lipidico supportato da vetro in vitro utilizzando la microscopia a fluorescenza a riflessione interna totale.

Questo video descrive la tecnica di studio dell'assemblaggio della proteina septina su microsfere rivestite con doppi strati lipidici. Questa tecnica aiuta a comprendere gli assemblaggi di proteine dipendenti dalla curvatura su superfici curve.

In questo video, dimostriamo un test di screening per identificare l'efficacia dei nematocidi a piccole molecole contro i nematodi. I nematocidi sono considerati efficaci se causano una diminuzione del numero di nematodi mobili nel campione dopo l'esposizione.

In questo video, descriviamo un metodo per la rilevazione dei depositi di calcio secreti dagli osteoblasti utilizzando un colorante anionico, Alizarin Red S. Gli osteoblasti in coltura vengono prima colorati e quindi il colorante viene recuperato per la quantificazione colorimetrica dei depositi di calcio o del grado di mineralizzazione degli osteoblasti.

In questo video, descriviamo il test di contatto larvale per valutare la tossicità dell'antagonista del recettore della dopamina amitriptilina sulle larve di zanzare al terzo stadio di stadio, vettori noti di diverse malattie infettive umane. La valutazione della mortalità larvale dopo l'incubazione con diverse concentrazioni di amitriptilina su diversi intervalli di tempo aiuta a determinare la sua concentrazione letale 50.

In questo video, dimostriamo il test topico per determinare la tossicità di un potenziale insetticida su zanzare femmine adulte. Utilizzando un antagonista del recettore della dopamina che causa l'inibizione letale della neurotrasmissione nelle zanzare, questo metodo descrive un modo per valutare gli effetti tossici degli insetticidi dopo l'applicazione topica.

Questo video mostra un test di alimentazione del sangue per valutare la mortalità e la fecondità dei composti in esame con nuove modalità d'azione sulle zanzare femmine. Questa tecnica aiuta nello screening di nuove classi di insetticidi per uccidere la popolazione resistente di zanzare e controllare la diffusione della malattia.

In questo video, dimostriamo un saggio di aggregazione proteica basato su cellule utilizzando inibitori del proteasoma, che bloccano l'attività del proteasoma, impedendo alle proteine mutanti mal ripiegate, fuse in un'etichetta fluorescente, di subire la degradazione del proteasoma ubiquitina-dipendente, portando al loro accumulo all'interno del citoplasma cellulare. Gli aggregati proteici vengono quindi visualizzati e quantificati mediante microscopia a fluorescenza.

Questo video dimostra un rapido biotest per studiare l'attività dell'endotossina in un campione di sangue intero tramite un metodo basato sulla chemiluminescenza. Questo test è un test rapido e sensibile dei biomarcatori per la diagnosi precoce della sepsi mediata da endotossine.

Questo video descrive il formato turbidimetrico del lisato di amoeciti Limulus, o LAL, per stimare la contaminazione da endotossine nelle nanoformulazioni di doxorubicina liposomiale PEGilata. La torbidità della soluzione a seguito della reazione dell'endotossina con il reagente LAL aiuta a stimare l'endotossina nel campione.

Questo video descrive un test gel-coagulo per determinare la presenza di endotossine batteriche in nano-formulazioni utilizzando Limulus Amoebocyte Lysate derivato dalle cellule del sangue dei granchi a ferro di cavallo. Il test aiuta a testare la contaminazione da endotossine dei prodotti farmaceutici, comprese le formulazioni a base di nanometria.

In questo video, dimostriamo un test ad alto rendimento per lo screening di enzimi attivi in carboidrati utilizzando substrati di idrogel polimerici cromogenici insolubili. L'enzima degrada questi substrati in un prodotto colorato solubile che può essere quantificato misurando l'intensità del colore del prodotto.

Questo video mostra un test per lo screening di enzimi efficaci nella degradazione di polisaccaridi complessi nella biomassa vegetale utilizzando biomassa cromogenica insolubile o ICB. Gli enzimi idrolizzano l'ICB per rilasciare oligosaccaridi solubili legati a coloranti e l'attività enzimatica viene valutata mediante analisi colorimetrica del prodotto di reazione.

Questo video dimostra un metodo di colorazione nucleare per rilevare l'effetto citotossico del mitocan su cellule tumorali sensibili ai farmaci e varianti sane. La doppia colorazione con coloranti leganti il DNA come lo ioduro di propidio e il colorante di Hoechst fornisce una chiara distinzione tra le cellule morte e quelle vive, aiutando così a valutare la citotossicità del farmaco.

In questo video, eseguiamo un test di motilità in vitro per analizzare le interazioni actina-miosina. Il movimento di scorrimento dei filamenti di actina sulle molecole di miosina immobilizzate viene visualizzato utilizzando la microscopia a fluorescenza.

In questo video, eseguiamo un test di motilità in vitro per analizzare le interazioni actina-miosina. Il movimento di scorrimento dei filamenti di actina sulle molecole di miosina immobilizzate viene visualizzato utilizzando la microscopia a fluorescenza.

Questo video dimostra l'azione capillare radiale differenziale del saggio del ligando, una tecnica per lo screening sistematico ad alto rendimento delle proteine leganti il secondo messaggero nucleotidico intracellulare. Questa tecnica consente il legame diretto dei messaggeri con la proteina bersaglio sovraespressa nel lisato cellulare, bypassando la necessità di purificazione delle proteine.

Questo video descrive un test di degradazione per proteine mal ripiegate utilizzando il trattamento con cicloesimide insieme al frazionamento del detergente. Questo metodo aiuta a studiare la dinamica delle proteine mal ripiegate e a scoprire i meccanismi approfonditi del turnover proteico.

Questo video descrive un test su micropiastra basato sulla fluorescenza in vitro per studiare la cinetica di degradazione di una proteina mutante della luciferasi mal ripiegata marcata in fluorescenza espressa nei nuclei di cellule di mammifero trasfettate. Il test prevede il trattamento di cellule che esprimono la proteina mutante fluorescente con un inibitore della traduzione e un inibitore del proteasoma per valutare la degradazione mediata dal proteasoma della proteina mal ripiegata.

Il video mostra il dosaggio della luciferasi utilizzato per quantificare le proteine marcate con luciferasi. Il test utilizza un enzima luciferasi ingegnerizzato composto da un frammento di grandi dimensioni che si lega al frammento piccolo, che è coniugato con una proteina di interesse. Le subunità legate formano un enzima attivo che, in presenza del substrato, rilascia un segnale luminescente. Questo segnale viene quindi quantificato utilizzando un luminometro.

Questo video mostra un test basato sull'imaging in vivo per determinare il declino della proteostasi dovuto all'invecchiamento. Il test utilizza Caenorhabditis elegans che esprime la proteina di fusione YFP della poliglutammina nei muscoli della parete corporea per misurare l'aggregazione della poliglutammina associata all'età e l'induzione della proteotossicità, che porta alla paralisi.

In questo video, dimostriamo il saggio omogeneo di prossimità luminescente amplificato, un saggio di prossimità basato su microsfere. Utilizza perline accettori e donatrici di dimensioni omogenee, immobilizzate con due proteine che tendono a interagire per schermare potenziali piccole molecole che inibiscono le interazioni proteiche.

Questo video mostra un test per monitorare l'acidificazione intestinale nelle mosche Drosophila. Dopo l'ingestione di cibo integrato con un colorante indicatore di pH, l'acidificazione del lume intestinale provoca un cambiamento nel colore del colorante. L'ispezione visiva del tratto digestivo delle mosche per esaminare il cambiamento di colore fornisce prove di acidificazione.

Questo video descrive un test basato su un lettore di piastre per misurare l'assorbimento di calcio mitocondriale in mitocondri isolati. Il test analizza il segnale di fluorescenza di un colorante fluorescente sensibile al calcio per studiare la cinetica dell'assorbimento mitocondriale del calcio e del sovraccarico di calcio.

Questo video descrive un metodo colorimetrico per quantificare il contenuto di proteine solubili nei tessuti vegetali. Il metodo utilizza il colorante Coomassie Brilliant Blue G-250, che interagisce con la proteina solubile per formare un complesso proteico-colorante stabile di colore blu, proporzionale al contenuto di proteine solubili nel tessuto.

Questo video descrive il metodo per quantificare i carboidrati digeribili presenti nei tessuti vegetali. Questo aiuta a raccogliere dati da vari tessuti vegetali per studiare l'ecologia nutrizionale, le interazioni pianta-erbivoro e le dinamiche della rete alimentare.

In questo video, dimostriamo il test della luciferasi per quantificare la crescita del patogeno intracellulare Toxoplasma gondii. Utilizzando un ceppo di Toxoplasma che esprime l'enzima luciferasi dopo aver infettato le cellule ospiti, l'attività della luciferasi viene rilevata nella coltura cellulare infetta per determinare il successo della riproduzione del parassita.

Il video mostra il dosaggio della luciferasi utilizzato per determinare l'efficacia di un inibitore chimico antiparassitario contro il patogeno intracellulare Toxoplasma gondii. Lo studio coinvolge parassiti che esprimono luciferasi che invadono le cellule ospiti per replicarsi e sopravvivere. L'inibitore chimico si lega con le proteasi della cisteina del parassita e ne inibisce la replicazione. L'attività della luciferasi rilevata è proporzionale alle variazioni di piega nella crescita del...

Questo video dimostra un protocollo in vitro per studiare la rimozione mediata da Msp1 di proteine TA mal localizzate integrate nel doppio strato lipidico dei liposomi. Le proteine Msp1 e TA sono co-ricostituite in liposomi e la traslocazione ATP-dipendente delle proteine TA è confermata attraverso la purificazione per affinità.

In questo video, descriviamo un metodo semplice e robusto per determinare il potenziale citotossico di un farmaco tripanocida contro un parassita, il Trypanosoma cruzi, che esprime l'enzima β-galattosidasi. La β-galattosidasi funge da indicatore di lisi cellulare e la sua attività può essere utilizzata per valutare gli effetti del farmaco.

In questo video, dimostriamo un test che indaga i meccanismi di rilascio delle monoammine dai neuroni di fette di cervello di ratto ex vivo metabolicamente attive, quando trattate con farmaci di prova. Il test dimostra che i farmaci neurostimolanti inducono il rilascio di monoammine attraverso i trasportatori cellulari delle monoammine, mentre un'elevata concentrazione di KCl induce il rilascio di monoammine vescicolari mediato dall'esocitosi delle vescicole sinaptiche.

Questo video descrive un metodo in vivo per esaminare il potenziale protettivo dei composti di test neuroprotettivi nel ridurre l'aggregazione polyQ nelle cellule muscolari della parete corporea dei nematodi e migliorare la proteotossicità associata all'aggregazione.

In questo video, descriviamo un metodo per valutare l'effetto neuroprotettivo di un composto in esame, l'astragalano, sulla sopravvivenza neuronale in Caenorhabditis elegans dalla neurotossicità mediata da polyQ. Il test utilizza Caenorhabditis elegans che esprime le ripetizioni polyQ anormalmente espanse fuse a GFP nei loro neuroni ASH per misurare la sopravvivenza neuronale dopo il trattamento con il composto in esame.

Questo video descrive un test di evitamento osmotico per esaminare il comportamento di chemioevitamento in un modello di verme transgenico. Il comportamento di evitamento viene testato in una piastra in presenza di una barriera ad alta osmotiche e di un chemioattrattivo. I vermi con una perdita funzionale di neuroni vengono attratti dal chemioattrattivo, attraversano la barriera ad alta osmotizzazione e si paralizzano nella zona della trappola a causa della soluzione anestetica.

Questo video descrive un test colorimetrico per la misurazione del lattato nei lisati cellulari utilizzando l'enzima lattato deidrogenasi. Questo enzima converte il lattato in piruvato, insieme alla conversione del NAD in NADH che reagisce con i coloranti tetrazolio e fornisce un prodotto colorato che può essere misurato spettrofotometricamente per quantificare il lattato.

Questo video descrive un test colorimetrico per misurare quantitativamente il piruvato nelle frazioni cellulari di Caenorhabditis elegans. Utilizzando il perossido di idrogeno prodotto dalla reazione enzimatica della piruvato ossidasi con il piruvato cellulare, un colorante cromogenico viene ossidato per produrre un prodotto colorato, misurato utilizzando la colorimetria per determinare la concentrazione di piruvato.

Questo video descrive un test spettrofotometrico per la stima dell'attività della glicogeno sintasi. Il metodo si basa sulla riduzione dell'assorbanza del NADH con il tempo e indica l'attività della glicogeno sintasi.

In questo video, descriviamo un saggio spettrofotometrico qualitativo per determinare l'entità della ramificazione in un campione di glicogeno con una struttura non caratterizzata. Il confronto dei massimi di assorbanza del campione non caratterizzato con quello dei polisaccaridi con strutture ramificate note indica la presenza di ramificazioni nel campione non caratterizzato.

Questo video mostra il test delle sostanze reattive all'acido tiobarbiturico (TBARS) per valutare lo stress ossidativo in campioni biologici.

Questo video mostra il test di complementazione della luciferasi divisa per rilevare le interazioni proteina-proteina. In questo saggio, le proteine di interesse sono etichettate con frammenti piccoli e grandi dell'enzima luciferasi. Quando le proteine interagiscono, i frammenti grandi e piccoli si combinano per formare un complesso enzimatico attivo, che in presenza di un substrato specifico, rilascia una luminescenza brillante che può essere misurata.

Questo video mostra la tecnica per la raccolta di un campione di terreno per l'analisi delle proprietà idrauliche. L'area di campionamento viene ripulita e la crosta superiore viene evacuata. L'anello di campionamento viene quindi posizionato nel terreno per raccogliere il campione. L'anello con il campione viene quindi pulito, etichettato, imballato e trasferito indisturbato per l'analisi.

Fonte:Léa Rubira1, Hélène Sturer1, Louise Combette1, Sandra Santini1, Stéphane Renaud1, Cyril Fersing1,21Dipartimento di medicina nucleare, Institut régional du Cancer de Montpellier (ICM), Univ Montpellier, 2IBMM, Univ Montpellier, CNRS, ENSCMQuesto video mostra l'infusione sicura e controllata di un radiofarmaco utilizzando una pompa peristaltica con un sistema a cassetta a doppia linea. La configurazione include il collegamento della soluzione salina e delle linee di infusione, il...

Source:Anthony J. Yosick1,2, Christine Massie1, Emma Knapp2, Hani A. Awad1,2,31Department of Biomedical Engineering, University of Rochester, US2Center for Musculoskeletal Research, Department of Orthopedics, University of Rochester Medical Center, USA3Department of Orthopedics, University of Rochester Medical Center, USAThe video demonstrates fall-related wrist fractures using human cadaver forearms with varying bone densities. Specimens are standardized by removing upper soft tissue,...

In questo video, dimostriamo un test per visualizzare e quantificare l'assorbimento cellulare di vescicole extracellulari o EV. Questo test utilizza l'imaging fluorescente 3D utilizzando un microscopio confocale e consente di distinguere le vescicole extracellulari internalizzate da quelle aderenti alla superficie cellulare.

Questo video descrive un test di invasione utilizzando un array a tre camere basato sull'impedenza elettrica. Questa tecnica misura il potenziale invasivo delle cellule tumorali sotto l'influenza di fattori solubili secreti dalle cellule stromali residenti nei microambienti tumorali.

In questo video, dimostriamo un test di protezione enzimatica in vitro basato sulla lisostafina per quantificare l'internalizzazione di Staphylococcus aureus nelle cellule A549. Il test aiuta negli studi qualitativi, quantitativi e di caratterizzazione della carica batterica intracellulare nelle cellule ospiti.

In questo video, descriviamo un saggio di riassorbimento osteoclastico in vitro su piastre di coltura cellulare rivestite di fosfato di calcio coltivate con osteoclasti derivati da cellule mononucleate di sangue periferico umano. Gli osteoclasti formano un caratteristico anello di actina sulla matrice rivestita di fosfato di calcio della piastra di coltura cellulare e degradano la matrice all'interno della regione dell'anello di actina per rilasciare ioni calcio e fosfato, con conseguente...

In questo video, descriviamo un saggio di separazione di fase, in cui le proteine intracellulari che comprendono regioni intrinsecamente disordinate fuse a un dominio di oligomerizzazione fotosensibile sono indotte tramite l'esposizione alla luce blu ad autoassociarsi in condensati liquidi senza membrana.

Questo video mostra un saggio modificato basato su microsfere di vettore che incorpora periciti per studiare la germinazione endoteliale durante le prime fasi dell'angiogenesi. Il test fornisce un modello sperimentale in vitro per comprendere i meccanismi molecolari dell'angiogenesi e l'effetto delle terapie anti-angiogenetiche.

Questo video descrive un test in vitro per determinare l'emolisi indotta da calcio-ionoforo o la lisi dei globuli rossi in un campione umano. Il test misura la percentuale di emolisi quantificando l'emoglobina rilasciata dagli eritrociti rotti.

In questo video, dimostriamo il test di legame dell'annessina V per misurare il grado di eriptosi, la morte cellulare programmata degli eritrociti, utilizzando la colorazione fluorescente con annessina V. Gli eritrociti apoptotici dimostrano la traslocazione della fosfatidilserina dal lembo interno a quello esterno della membrana cellulare, facendo sì che l'annessina V marcata con fluoroforo si leghi alla fosfatidilserina traslocata, emettendo così un segnale fluorescente.

Questo video dimostra una tecnica in vitro per valutare la biodisponibilità del ferro in fonti alimentari complesse. La tecnica combina la simulazione della digestione umana con l'assorbimento del ferro da parte delle cellule Caco-2 differenziate. La formazione intracellulare di ferritina agisce come marcatore per l'assorbimento cellulare del ferro.

Questo video mostra un test in vitro per misurare indirettamente l'assorbimento intracellulare del glucosio. Il test utilizza un analogo del glucosio marcato in fluorescenza per stabilire una correlazione tra la deplezione extracellulare del glucosio e l'assorbimento intracellulare del glucosio.

In questo video, dimostriamo una tecnica ex vivo per misurare la deplezione dell'analogo del glucosio extracellulare negli organi di topo prelevati. Consiste nell'incubare il tessuto di topo in una soluzione contenente deossiglucosio marcato in fluorescenza, che viene assorbito dalle cellule. L'assorbimento dell'analogo del glucosio può essere determinato indirettamente misurando la fluorescenza del terreno incubato.

Questo video descrive la misurazione della contrazione delle cellule muscolari lisce aortiche (SMC) utilizzando il rilevamento dell'impedenza del substrato elettrico della cellula, o ECIS. L'ECIS misura la locomozione delle cellule ed è un metodo affidabile per misurare le contrazioni.

In questo video, descriviamo un metodo in vitro per valutare il potenziale allergico di un antigene di indurre la degranulazione dei basofili. La β-esosaminidasi viene utilizzata come indice del rilascio di mediatore chimico e l'attività enzimatica della β-esosaminidasi viene misurata utilizzando un substrato fluorogenico.

In questo video, dimostriamo un test rapido a singola aggiunta per valutare la vitalità cellulare in organoidi derivati da pazienti dopo il trattamento con un agente di prova che utilizza i livelli intracellulari di ATP come marcatore per l'attività metabolica cellulare. I livelli intracellulari di ATP sono misurati utilizzando la reazione luciferasi/luciferina, dove l'intensità della luce emessa indica la vitalità cellulare e, a sua volta, la potenza inibitoria della crescita dell'agente in...

Questo video descrive la tecnica di visualizzazione dello stress ossidativo in organoidi coltivati. Questo lavoro aiuta a comprendere il livello di stress ossidativo dovuto all'accumulo di ROS nei vari tipi di cellule presenti in un organoide dopo il trattamento con diversi modulatori di ROS.

Questo video mostra un test di citometria a flusso per quantificare i livelli di ROS in organoidi intestinali 3D ottenuti da topi transgenici che esprimono GFP. Questo metodo fornisce un modello sperimentale in vitro per studiare l'efficacia dei composti in esame sulla produzione di ROS.

In questo video, dimostriamo un metodo per valutare l'effetto degli osmoliti sulla formazione di persistenti batterici. Le cellule batteriche vengono prima esposte agli osmoliti per indurre lo stress osmotico, innescando la formazione di persister, quindi trattate con antibiotici per enumerare i persistenti.

Questo video dimostra un metodo basato sulla microscopia a fluorescenza per studiare la competizione batterica a livello di singola cellula. Questo metodo fornisce informazioni sulla struttura e la funzione delle comunità batteriche.

Questo video descrive il test della placca virale del virus infettivo dell'herpes simplex o HSV. Le particelle virali diluite vengono inoculate nel monostrato di cellule epiteliali. Dopo l'incubazione, il virus forma placche e viene contato visivamente per determinare il titolo del virus infettivo.

In questo video, il test TUNEL viene eseguito per rilevare la presenza di cellule apoptotiche in un campione. Lo studio prevede l'utilizzo di una speciale DNA polimerasi - deossinucleotidil transferasi terminale - che catalizza l'aggiunta di dUTP marcate all'estremità 3' del DNA frammentato, che può essere osservato e identificato al microscopio a fluorescenza.

Questo video descrive un test luminescente in vitro Caspase-3/7 per quantificare la morte cellulare o l'apoptosi. Il test misura la luminescenza prodotta in seguito alla scissione della caspasi-3/7 di un substrato DEVD proluminescente. La luminescenza generata è proporzionale all'attività della caspasi-3/7.

Questo video mostra una tecnica di immunocolorazione per visualizzare l'inghiottimento di cellule apoptotiche nelle cellule embrionali omogeneizzate di Drosophila melanogaster. Questo metodo fornisce informazioni sulla fisiologia cellulare determinando l'entità dell'inghiottimento delle cellule apoptotiche.

In questo video, dimostriamo il test di efferocitosi per studiare la clearance delle cellule apoptotiche utilizzando la microscopia confocale. L'efferocitosi è un processo in più fasi in cui le cellule apoptotiche vengono inghiottite dai fagociti e degradate all'interno di vescicole chiamate efferosomi. Questo protocollo fornisce un metodo per visualizzare porzioni internalizzate e non internalizzate di singole cellule apoptotiche e quantificare l'efferocitosi.

In questo video, dimostriamo che in presenza di un inibitore del fosfodiestere, il ciclo cellulare dell'ovocita viene arrestato alla profase-I, durante la quale gli mRNA trascritti vengono conservati in assenza di traduzione. Dopo il rilascio dell'inibitore, la maturazione degli ovociti riprende e le cellule entrano in metafase. Il segnale dell'mRNA reporter fuso con il gene bersaglio nella metafase-I indica l'attivazione del meccanismo traduzionale e l'espressione proteica.

Questo video descrive un test fluorimetrico in vitro per valutare gli effetti delle formulazioni di lacrime artificiali sull'attività metabolica cellulare delle cellule epiteliali corneali utilizzando la soluzione di blu Alamar a base di resazurina. Una formulazione non tossica mantiene le cellule in uno stato sano e metabolicamente attivo, facilitando la riduzione della resazurina in una resorufina altamente fluorescente.

Questo video descrive un test basato sull'imaging al microscopio confocale per misurare l'assorbimento di calcio mitocondriale nelle cellule in coltura. Il test utilizza il colorante fluorescente sensibile al calcio Rhod-2/AM per misurare il calcio mitocondriale in cellule coltivate permeabilizzate.

Questo video discute il test di perdita di fluorescenza per studiare le interazioni dei peptidi che penetrano nelle cellule con le membrane cellulari utilizzando imitatori della membrana cellulare: grandi vescicole unilamellari, o LUV, incapsulate con un colorante fluorescente e un quencher.

Questo video dimostra una tecnica di analisi per valutare la calcificazione delle cellule interstiziali della valvola aortica in vitro. Il test aiuta a quantificare la concentrazione di calcio utilizzando il reagente arsenazo III, un colorante sensibile al calcio che reagisce con gli ioni calcio per formare un complesso calcio-arsenazo di colore viola.

Questo video descrive la tecnica per registrare l'attività epilettiforme di fette organotipiche della corteccia rinale-ippocampo ex vivo utilizzando l'elettrofisiologia o l'EEG. Questo aiuta a studiare la dinamica e la progressione dell'epilettogenesi e a selezionare potenziali bersagli terapeutici per il trattamento dell'epilessia.

Questo video descrive un test di guarigione delle ferite in co-coltura senza contatto per valutare la capacità migratoria dei mioblasti murini. Questo aiuta a comprendere i componenti di invio e ricezione del segnale delle interazioni di segnalazione Wnt non canoniche paracrine in vitro.

Il video mostra il test della cometa per rilevare danni al DNA in seguito all'esposizione ad agenti nocivi. In condizioni alcaline, il DNA si srotola e si denatura, e dopo l'elettroforesi, il DNA integro e danneggiato migra in modo diverso nel gel di agarosio, formando una struttura a forma di cometa. Il DNA intatto che migra lentamente forma la testa circolare della cometa, mentre i frammenti di DNA danneggiati che migrano rapidamente formano la coda allungata della cometa.

Questo video dimostra una tecnica in vitro per stimare l'assorbimento di aminoacidi da parte delle cellule stromali derivate dal midollo osseo. I trasportatori di amminoacidi Na+-dipendenti mediano l'assorbimento degli amminoacidi radiomarcati all'interno delle cellule e l'assorbimento cellulare viene stimato misurando la radioattività.

In questo video, dimostriamo il processo di monitoraggio in tempo reale degli eventi cellulari, inclusa la proliferazione delle cellule aderenti, tramite un test di impedenza cellulare. Qui, le celle aderenti fungono da isolanti, limitando il flusso di corrente tra gli elettrodi e aumentando l'impedenza.

In questo video, discutiamo la correlazione tra il CIT50 e la molteplicità delle infezioni virali. Le cellule infettate dal virus mostrano effetti citopatici, causando la loro morte e il distacco dal microelettrodo d'oro, che a sua volta riduce l'impedenza.

Questo video descrive una tecnica basata sull'impedenza cellulare per studiare la cinetica di sopravvivenza dei virus che inducono effetti citopatici. Il metodo misura l'impedenza elettrica delle cellule aderenti infettate da virus pretrattate con soluzione fisiologica.

Questo video dimostra lo sviluppo di un modello ex vivo di germinazione coroideale per studiare l'angiogenesi microvascolare oculare. Il test prevede la coltura di espianti di occhio di topo contenenti il tessuto coroideo attaccato alla sclera e all'epitelio pigmentato retinico in condizioni specifiche che promuovono la germinazione microvascolare coroideale.

Questo video descrive un test reporter basato su cellule per determinare l'attività estrogenica di composti di origine vegetale. Un composto con attività estrogeno-simile imita il suo legame con i recettori degli estrogeni e guida a valle la trascrizione genica dell'enzima reporter. L'enzima reporter genera bioluminescenza in una reazione, indicando l'attività estrogenica del composto.

Questo video descrive il trasferimento di energia di risonanza di Förster risolto nel tempo o il saggio TR-FRET per determinare la fosforilazione endogena delle proteine con l'aiuto di fluorofori donatori e accettori marcati su anticorpi specifici per una proteina in esame. Questa tecnica è progettata per misurare la fosforilazione delle proteine in esame nei lisati cellulari.

In questo video, descriviamo un metodo basato sulla luminescenza per valutare la neurotossicità dei composti di piccole molecole che promuovono la crescita dei neuriti sulla vitalità dei neuroni derivati da hNPC. Il test misura il livello intracellulare di ATP, un indicatore della vitalità cellulare, per valutare la neurotossicità dopo il trattamento con il composto in esame.

Questo video mostra la tecnica di multispettrometria ecografica a radiofrequenza (REMS) per la valutazione della densità minerale ossea (BMD). Il paziente viene posizionato supino e il gel per ultrasuoni viene applicato al collo del femore, un sito soggetto a frattura nel femore. La sonda emette quindi onde ultrasoniche, che si riflettono sul tessuto osseo a una velocità influenzata dalla BMD. La sonda cattura queste onde riflesse, consentendo la quantificazione della BMD.

Questo video mostra l'aspirazione percutanea di spermatozoi epididimali da un paziente con azoospermia, una condizione caratterizzata dall'assenza di spermatozoi nel liquido seminale. La procedura prevede la disinfezione dell'area scrotale, l'aspirazione del liquido epididimico utilizzando una siringa con una soluzione di coltura specializzata e l'elaborazione del campione raccolto per isolare gli spermatozoi vitali. Gli spermatozoi preparati sono quindi pronti per l'uso nelle procedure...

Fonte:Elettra Leo1, Luiza H.D. Cardoso1, Sabine Schmitt1, Erich Gnaiger11Strumenti OroborosQuesto video spiega come il flusso di ossigeno viene utilizzato per valutare la respirazione mitocondriale nelle cellule di mammifero viventi e permeabilizzate. Dimostra l'uso sequenziale della digitonina, dei substrati metabolici, dell'ADP, di un disaccoppiatore e di un inibitore per caratterizzare diversi stati respiratori. Il profilo del flusso di ossigeno risultante rivela la funzione mitocondriale e...

Questo video descrive una tecnica di immunodosaggio che utilizza microsfere magnetiche fluorescenti accoppiate con diversi antigeni per rilevare simultaneamente vari isotipi di anticorpi in un campione di siero. Il test è utile per comprendere la sieroconversione durante un'infezione o dopo la vaccinazione.

In questo video, dimostriamo un test di immunoprecipitazione, chiamato test di cattura VLP, per isolare particelle simili a virus che visualizzano l'antigene, o VLP, da un campione. L'antigene si lega con anticorpi specifici legati a biglie magnetiche, formando un complesso antigene-anticorpo immobilizzato che viene successivamente separato e conservato per ulteriori analisi.

Questo video mostra una tecnica di quantificazione sensibile della fosforilazione delle proteine utilizzando un saggio di pull-down a singola molecola. La funzionalizzazione del polietilenglicole-biotina e l'uso di anticorpi marcati aumenta la rilevazione della tirosina fosforilata con specificità.

Questo video dimostra il metodo in vitro per la SUMOilazione delle proteine del substrato utilizzando una cascata enzimatica sequenziale. Inoltre, lo stato SUMOilato della proteina viene identificato utilizzando l'elettroforesi e la tecnica dell'immunoblotting.

In questo video, mostriamo il test basato sul sistema HiBit-RBD bioreporter per rilevare gli anticorpi neutralizzanti SARS-CoV-2. Questo sistema prende di mira il dominio RBD virale utilizzando un sistema reporter bioluminescente contenente HiBiT fuso al dominio RBD.

In questo video, dimostriamo un test colorimetrico in vitro per rilevare la presenza di anticorpi neutralizzanti contro i vettori del sierotipo 6 del virus adeno-associato ricombinante che esprimono fosfatasi alcalina (rAAV6) in campioni di siero di pecora. Il test utilizza la reazione tra l'AAV, che codifica per un gene della fosfatasi alcalina placentare umana, e il suo substrato per generare un prodotto viola insolubile.

Questo video dimostra un test altamente sensibile basato sull'immunofluorescenza per rilevare il danno ossidativo indotto da PM2,5 nel cuore di embrioni di zebrafish misurando i livelli di 8-OHdG e γH2AX, che indicano rispettivamente il danno al DNA e le rotture del DNA a doppio filamento.

Questo video dimostra la tecnica di valutazione della morte neuronale in fette organotipiche di corteccia rinale-ippocampo. La morte neuronale si verifica attraverso crisi epilettiche in evoluzione, simili all'epilessia in vivo, e viene rilevata attraverso la doppia colorazione delle cellule morte utilizzando ioduro di propidio e immunofluorescenza.

Questo video dimostra il rilevamento di complessi anticorpo-antigene coniugati chimicamente tramite il test di immunoassorbimento enzimatico a sandwich, o ELISA, tecnica. L'anticorpo catturato si lega all'epitopo specifico dell'antigene del coniugato anticorpo-antigene, che può essere successivamente visualizzato utilizzando un anticorpo secondario legato all'enzima.

In questo video, dimostriamo un test di immunofluorescenza basato su EGFP per identificare l'efficacia delle proteine bersaglio sulla crescita neuritica dei neuroni corticali primari. I neuroni primari vengono trasfettati con una proteina fluorescente, EGFP, e una proteina bersaglio, quindi viene eseguito un test immunologico per studiare l'effetto della proteina bersaglio sulla crescita dei neuriti.

In questo video, dimostriamo il test immunologico di elettrochemiluminescenza per la quantificazione dei livelli di proteine bersaglio in diversi campioni. Questo test si basa sulla luminescenza prodotta nella reazione elettrochimica. L'intensità della luce emessa è proporzionale alla quantità della proteina bersaglio nel campione.

Il video descrive la preparazione di un campione di tessuto per l'imaging della citometria di massa. Il tessuto viene prima elaborato per smascherare gli epitopi dell'antigene, permeabilizzare le cellule e bloccare i siti di legame degli anticorpi non specifici. Quindi, il tessuto viene incubato con un cocktail di anticorpi coniugati con metallo e una colorazione nucleare. Infine, il campione di tessuto trattato viene analizzato utilizzando uno scanner ottico.

Questo video mostra la preparazione di plasma ricco di piastrine (PRP) di alta qualità mediante screening per la conta piastrinica, raccolta e centrifugazione del sangue e isolamento delle piastrine. Questo PRP è utilizzato in applicazioni terapeutiche per la rigenerazione e la guarigione dei tessuti.