Saggio di aggregazione PolyQ per identificare l'effetto neuroprotettivo di un composto nei vermi

In alcune malattie neurodegenerative, la proteina associata alla malattia comprende un tratto espanso di poliglutammina, polyQ, - una stringa di residui consecutivi di glutammina - ed è conformata in modo aberrante. La conformazione alterata destabilizza l'omeostasi proteica, causando l'accumulo di proteine e la formazione di aggregati tossici, portando alla disfunzione neuronale e alla morte.

Per esaminare la capacità protettiva di un composto in esame nell'alleviare la proteotossicità associata all'aggregazione polyQ, ottenere una sospensione di larve transgeniche di Caenorhabditis elegans che esprimono proteine polyQ marcate in fluorescenza nelle cellule muscolari della parete corporea.

Prelevare una piastra a più pozzetti contenente terreni integrati con cibo batterico. Aggiungere il composto di prova in una serie di pozzetti. Trasferire le larve nella piastra a più pozzetti. Sigillare la piastra per evitare la disidratazione del terreno e la contaminazione microbica. Incubare, permettendo alle larve di crescere fino a diventare adulte.

Durante lo sviluppo, con l'invecchiamento del nematode, le proteine polyQ si accumulano progressivamente all'interno delle cellule muscolari e