Tecnica di microgravimetria dissipativa per studiare l'interazione a doppio strato proteina-lipidi

Per studiare l'interazione tra una proteina legante i fosfolipidi e un doppio strato lipidico attraverso la microgravimetria dissipativa, prendere una microbilancia con un sensore al quarzo. Dopo l'applicazione di una tensione adeguata, lo strato di quarzo, inserito tra due elettrodi metallici, oscilla a una frequenza specifica.

Aggiungere una sospensione di piccole vescicole unilamellari, costituite da un singolo doppio strato lipidico, sul sensore. Le vescicole si adsorbono sulla superficie idrofila rivestita di silice, aumentando la massa del sensore e diminuendo proporzionalmente la sua frequenza di oscillazione.

Le vescicole riempite di tampone agiscono come uno strato viscoelastico, portando alla dissipazione, ovvero allo smorzamento dell'oscillazione. Le vescicole adsorbite si rompono, rilasciando il tampone racchiuso. La conseguente diminuzione della massa aumenta la frequenza di oscillazione.

Le vescicole rotte formano un doppio strato continuo, imitando una membrana biologica. La rigidità del doppio strato diminuisce la dissipazione.

Aggiungi un tampone contenente ioni calcio, insieme alla proteina bersaglio. Gli ioni calcio si legano alla proteina e ne modificano la conf