Sonda di forza biomembrana per quantificare le interazioni recettore-ligando

L'interazione tra un recettore delle cellule T, TCR, e un peptide antigenico presentato dall'MHC, o complesso maggiore di istocompatibilità, su una cellula presentante l'antigene, APC, fa sì che la cellula T eserciti una forza meccanica sull'APC. Questo fenomeno è necessario per l'attivazione delle cellule T.

Per quantificare le interazioni recettore-ligando utilizzando una sonda di forza a biomembrana, BFP, iniziare con una camera cellulare personalizzata basata su vetrino. Posizionare la camera cellulare al microscopio.

Iniettare nella camera sospensioni di globuli rossi rigonfi biotinilati, perle di vetro della sonda rivestite con complessi MHC-streptavidina-biotina legati a peptidi e cellule T. Posizionare la sonda, il target e le micropipette riempite di tampone ausiliario intorno alla camera.

Aspirare un globuli rossi biotinilato con la pipetta della sonda, posizionandolo in un'area vuota. Aspirare una cellula T con la micropipetta target, posizionandola sulla destra dei globuli rossi. Aspirare un cordone sonda con la micropipetta helper e collegarlo all'apice del globuli rossi. La streptavidina della perlina si lega alla biotina dei globuli rossi e forma una sonda di forza.