JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Tecniche Biologiche
0 visualizzazioni • 6:47 min. • July 8th, 2025
Inizia incubando le molecole di colorante reporter Raman con nanoparticelle d'oro affinché i reporter si leghino alle nanoparticelle.
Aggiungere glicole polietilenico, anticorpi coniugati con PEG specifici per l'antigene bersaglio. Gli anticorpi si attaccano covalentemente alle nanoparticelle attraverso il legame oro-disolfuro. Aggiungere PEG coniugati con tiolo per bloccare i restanti siti di nanoparticelle e prevenire l'aggregazione di nanoparticelle, formando sonde di nanoparticelle.
Rivestire i pozzetti della piastra di immunodosaggio con l'antigene bersaglio. Bloccare i restanti siti della piastra con una soluzione contenente proteine. Aggiungi le sonde di nanoparticelle. Eseguire la diluizione seriale della sonda attraverso i pozzetti. Incubare affinché gli anticorpi nelle sonde si leghino agli antigeni, formando complessi.
Utilizzare un microscopio Raman per determinare la risposta ottica della sonda. Il laser monocromatico incidente eccita gli elettroni superficiali delle nanoparticelle d'oro e ne provoca l'oscillazione, creando un elevato campo elettromagnetico locale sulla superficie della sonda.
Il raggio incidente e i reporter Raman interagiscono, causando una maggiore
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