JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 4:39 min. • July 8th, 2025
Le cellule dendritiche plasmacitoidi, o pDC, sono cellule immunitarie che rispondono all'infezione producendo l'interferone citochina di tipo I.
Per generare pDC in vitro, assumere una sospensione di cellule progenitrici linfoidi comuni, o CLP, isolate dal midollo osseo di topo. I CLP possono differenziarsi in linfociti e cellule dendritiche.
Aggiungere la sospensione cellulare su uno strato di cellule alimentatrici - cellule stromali aderenti - irradiate con raggi gamma per inibire la proliferazione. Le cellule di alimentazione forniscono le citochine e il contatto cellula-cellula necessari per la differenziazione dei CLP.
Aggiungere un'adeguata concentrazione di ligando tirosin-chinasi 3 simile a Fms-like, o FL – una citochina bivalente che promuove lo sviluppo di pDC – e incubare.
I CLP migrano tra le cellule di alimentazione e proliferano per formare gruppi di cellule, chiamate aree di ciottoli.
Il FL nel mezzo si lega al recettore Flt3 - un recettore tirosin-chinasico - sui CLP. Il legame induce la dimerizzazione del recettore e l'autofosforilazione dei residui di tirosina sul dominio citoplasmatico.
Le proteine adattatrici citoplasmatiche si legano a questi residui e vengono
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