Una tecnica per isolare i mastociti primari da una cavità peritoneale murina

I mastociti, globuli bianchi contenenti granuli citoplasmatici pieni di mediatori dell'infiammazione, svolgono un ruolo importante nelle risposte immunitarie innate e adattative.

Per isolare i mastociti di tipo tessuto connettivo dalla cavità peritoneale – uno spazio pieno di liquido che ospita gli organi addominali – prendi un topo soppresso fissato in posizione supina. Praticare un'incisione longitudinale fino allo sterno, esponendo la parete addominale.

La cavità peritoneale si trova sotto la parete addominale e contiene un liquido che ospita diverse cellule immunitarie tra cui macrofagi, linfociti, leucociti polimorfonucleati e mastociti.

Per isolare le cellule mediante lavaggio peritoneale, aspirando il contenuto intraperitoneale, iniettare un mezzo di crescita ghiacciato nella cavità peritoneale senza perforare gli organi, evitando perdite di sangue. Il terreno freddo aiuta a mantenere la vitalità cellulare.

Agitare con cura il topo per una durata adeguata, mescolando le cellule immunitarie con il terreno. Inserire una siringa vuota nella cavità. Aspirare lentamente il terreno, recuperando la maggior parte del fluido iniettato per una migliore resa cellulare.

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