Monitoraggio delle dinamiche di reclutamento dei neutrofili e della carica batterica nel sito di infezione in un modello murino

Per monitorare il reclutamento dei neutrofili, cellule immunitarie essenziali che facilitano l'eliminazione batterica, iniziare con un topo anestetizzato, transgenico e immunocompromesso con una ferita che espone il tessuto connettivo sul dorso.

I neutrofili del topo transgenico esprimono una proteina fluorescente verde potenziata, che facilita il tracciamento dei neutrofili. Inoltre, la loro ridotta capacità di uccidere i batteri rende il topo più suscettibile alle infezioni.

Prendiamo un inoculante batterico geneticamente modificato che possiede caratteristiche di bioluminescenza, ovvero di emissione della luce.

Iniettare l'inoculo batterico nel sito ferito, assicurandosi che venga erogato tra il tessuto connettivo e la fascia, uno strato di tessuto fibroso sotto il tessuto connettivo. Nel sito di iniezione, i batteri proliferano e colonizzano, causando l'infezione dei tessuti.

In risposta all'infezione, le cellule immunitarie rilasciano chemochine, molecole di segnalazione chimica che attirano i neutrofili. I neutrofili migrano rapidamente attraverso la chemiotassi, il movimento indotto da sostanze chimiche, e stravadono attraverso i vasi sanguigni nel tessuto in prossimità dell