JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 6:51 min. • July 8th, 2025
In seguito all'esposizione ai patogeni, i macrofagi subiscono l'attivazione e rilasciano citochine pro-infiammatorie e anti-infiammatorie, coordinando la risposta del sistema immunitario.
Per studiare l'attivazione dei macrofagi derivati dal midollo osseo in vitro, trasferire una sospensione isolata di cellule di midollo osseo di topo in un pallone di coltura. Incubare brevemente.
Le cellule mesenchimali, i monociti e i macrofagi maturi aderiscono alla superficie del pallone mentre i progenitori ematopoietici rimangono in sospensione.
Raccogliere i terreni contenenti i progenitori ematopoietici e centrifugare. Trasferire le cellule risospese nel fattore stimolante le colonie di macrofagi, M-CSF, in un pallone di coltura.
L'M-CSF fa sì che la sottopopolazione progenitrice mieloide si differenzi in macrofagi, che appaiono ramificati e aderiscono al pallone.
Eliminare il terreno contenente cellule non aderenti. Aggiungere i terreni M-CSF e incubare. Una volta che i macrofagi raggiungono il loro stato di piena funzionalità, raccoglieli. Centrifuga.
Macrofagi a piastre risospesi in terreni M-CSF in pozzetti a piastre multipozzetto. Dopo l'adesione dei macrofagi ai pozzetti, aggiungere i
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