Colorazione con ematossilina ed eosina per valutare il danno al colon nella colite indotta da DSS

0 visualizzazioni • 3:50 min. • July 8th, 2025

Il destrano solfato di sodio, o DSS, induce la colite, una malattia infiammatoria intestinale, in cui la rottura della barriera epiteliale intestinale porta all'infiammazione.

Per valutare il danno tissutale, prelevare il tessuto del colon fisso isolato da un modello murino di colite indotta da DSS. Immergere il tessuto in un mezzo di inclusione per facilitare il sezionamento e congelare rapidamente.

Utilizzando un crio-microtomo, ottenere una sottile sezione di tessuto e raccoglierla su un vetrino.

Immergere il vetrino in una soluzione contenente colorante ematossilina ossidato legato al mordente - un catione metallico - che conferisce una carica positiva al colorante. Il complesso colorante-mordente si lega al DNA caricato negativamente, colorando il nucleo di colore rossastro-violaceo.

Immergere il tessuto in una soluzione acido-alcolica differenziante, rimuovendo il colorante non specificamente legato dal citoplasma e dalla matrice extracellulare. Sciacquare il fazzoletto con un agente azzurrante, un mezzo alcalino, che conferisce un colore blu ai nuclei, migliorando il contrasto.

Immergere il vetrino in concentrazioni crescenti di alcol per disidratare il tessuto migliorando l

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Sezionamento di tessuto del colon